1932年Shope首先发现棉尾兔(CottontailRabbit)的乳头瘤由病毒引起,用疣浸液注射野兔或家兔能引起疣,部分患疣家兔发展为癌。该病毒是第一个哺乳动物致癌病毒的模型,称棉尾兔乳头瘤病毒(CottontailRabbitPapillomaVirus,CRPV)。以后相继从羊、鹿、牛、马、狗等动物也分离到此病毒。此外,还从鶸类(Chaffinch)分离到禽类的乳头瘤病毒。
对最常应用的3个轮状病毒(RV)标准株(人的Wa株,牛的NCDV株,猴的SA_(11)株)进行了形态学、培养特性及理化性质的比较观察与检测。它们在MA_(104)细胞上的培养特性基本相同,在电镜下呈现RV特有的形态结构,RNA电泳图具有典型的电泳带分布模式4、2、3、2规律,各项理化性质亦与文献报道一致。表明RV的细胞适应株的生物学性状有相当高的稳定性。
以HFRS病毒感染的乳小白鼠脑为原材料,用硫酸鱼精蛋白和PEG沉淀法制备粗病毒抗原。将此粗制抗原通过抗HFRS病毒MeAb与Separose4B偶联制成的免疫吸附柱,并用3MKCNS洗脱,获得了SDS-PAGE均一纯的特异性病毒结构蛋白,分子量为50,000道尔顿,具有较高的抗原滴度和良好的免疫原性。初步认为该蛋白可能是HFRS病毒的一种囊脱蛋白。
本文采用SDS-PAGE银染法,分析了蔗糖梯度纯化的乙型脑炎病毒SA14株(JEV-SAl4)的结构蛋白。证明JEV-SAl4有三个结构蛋白:VP_1,VP_2和VP_3,分子量分别为9200;12,200和53,000。用非还原和还原双向电泳证明,它们都是以分子单体的形式存在于病毒颗粒上。
对三系转化的人胚肺细胞,分别在裸鼠体内进行了成瘤试验。其中两系转化细胞(29—33代)的成瘤率达100%,另一系(47代)为66%。转化细胞诱生的肿瘤生长迅速,局部瘤可循淋巴转移。瘤细胞可在裸鼠体内传代。瘤细胞形态学检查证实为低分化癌。该细胞带有HSV抗原。
我们用CTN-1狂犬病毒二倍作细胞适应株[1]经蚀斑纯化而获得的CTN-2病毒株在BHK-21单层细胞培养建立了狂犬病毒的简易蚀斑技术。用连续10倍稀释的病毒悬液接种BHK-21细胞而产生的蚀斑数呈10倍规律的减少。该蚀斑技术用于蚀斑减少中和试验测定不同国际单位(IU)效价的抗狂犬病血清与原抗血清(IU)效价均高低成正比。用蚀斑中和试验测定了七批我国生产的人用精制抗狂犬病血清的IU效价与原抗血清IU效价的高低是相符的。
本试验描述了以~(125)I—UdR为基质检测dTK活性的方法。发现HSV—1,HSV—2在感染的HeLa细胞中诱导产生了高活性的dTK,同时证明了病毒dTK对新的抗病毒化合物——DHPG存在较高的敏感性,并讨论了其敏感性与DHPG抗病毒作用的关系及其捡测dTK的可能意义。
为了研究可疑促癌剂乌桕及了哥王提取物的作用,我们采用我室HSV_2诱发小白鼠宫颈癌的动物模型,进行体内促癌实验。这篇论文报道了实验结果。小白鼠分成6组,每组癌发率如下:HSV_2+0.9%;NaCl:13.0%;HSV_2+乌桕:40.0%;HSV_2+了哥王:36.4%;HSV_2+巴豆油:55.0%;乌桕+0.9%NaCl:7.7%;了哥王+0.9%NaCl:0。经过x~2检验指出差别在统计学上具显著性。因此我们提出:乌桕和了哥王提取物对小鼠宫颈癌有促进作用。与巴豆油提取物比较,其中巴豆油作用较强,乌桕作用次之,了哥王作用较弱。
按照Peattie(1979)直接化学定序法测定了某些植物病毒RAs(KYMV,CYVV,APLV和EMV)3’末端区域的核苷酸顺序。基于核苷酸顺序资料参照TYMV-RNA模型(Rietveld等,1982)提出它们3’末端的可能二级结构,即tRNA-样结构。KYMV、CYVV、OYMV、APLV和EMV-RNA3’末端的tRNA-样结构完全一致。此种对缬氨酸具有特异性的tRNA-样结构与真核生物缬氨酸tRNA也极为相似。缬氨酸反密码子(CAC)位于tRNA-样结构的适当部位。这些植物病毒RNA的核苷酸由于硷基配对在氨基酸接受臂内能产生12个硷基对的共轴堆砌。3’末端区域具有……(CC)A_(OH)末端。本实验结果支持Rietveld等1982年提出的TYMV-RNA3’末端二级结构模型。最后简要地讨论了tRNA-样结构的可能作用。
我们用我院制备的MC-1型微载体成功地培养了BHK-13,BHK-21,和CHO-KI三株细胞。当微载体浓度为5mg/ml,细胞接种量为30×10~4细胞/ml左右时,一般在三天都可达到1×10~6细胞/ml。此时接种10~(-1)或10~(-2)的VSV,在37℃培养20-24小时,病毒产量可达到6LogTCTD_(50)/ml以上,其中以CHO-KI细胞的产量最高,它们与静止培养的细胞产量基本一致,也不亚于鸡胚细胞增殖的产量。目前用该系统增殖的VSV已用于IFN的研究工作中。实验的结果也表明,用该系统增殖其它病毒和制备疫苗,以及大量培养已引入重组IFN基因的CHO工程细胞也将是可行的。
流行性出血热病毒陈株、L_99和SR_11株按种传代淋巴细胞克隆株Ly-A_6后第5~7日观察到CPE,开始时受感染细胞浆内颗粒增多,细胞圆缩、聚积成堆,随后细胞膜模糊不清,2~3天脱落,同时制片IFA检测到胞浆内特异性荧光颗粒,以上结果能被EHF免疫血清所中和。接种病毒后的细胞单层用l%甲基纤维素加维持液覆盖,第6日吸去覆盖液,加5%甲醛-1%结晶紫固定染色可见到明显的PFU。EHFV致病变细胞株的染得将为病原学研究提供了优越的基质细胞。
为寻找激活细胞免疫的制剂及定量分析免疫细胞对HSV-2复制的影响,作者先以不同干扰素处理及HSV-2感染C_(57)BL/6J小鼠,而后取其脾及淋巴结制成细胞悬液,加至HSV-2感染的Vero单层细胞中,37℃混合培养48小时后,大多数Vero细胞无异常形态改变,但在此单层中,可见一些大小不等,形态不一的无细胞区。在此区边缘,可见脾及淋巴结细胞包绕有病理形态改变的Vero细胞;来加脾及淋巴结细胞的感染性单层则显示细胞变大、变园、融合等病理性形态学变化,但仍维持完整的单层状态。将以上培养物冻溶后测病毒效价发现,不同来源、不同数量的脾及淋巴结细胞对HSV-2的复制均有一定抑制作用,但以经HSV-2感染及γ干扰素处理的小鼠之脾细胞作用最强。在此细胞与靶细胞比例为100:1时,病毒复制受抑制的Log_(10)数可达4以上。该抑制作用与非特异性可溶性细胞毒性物质、营养代谢,pH、干扰素等因素无关。以上结果提示:采取适当方法激活并吸引免疫细胞抵达病毒感染部位,溶解感染细胞或破坏其与正常细胞的联系,可能会更有效地对抗通过细胞途径扩散的病毒性感染。
从沈阳地区分离到侵染大白菜(Brassicapekinensis)及萝卜(Raphanussativus)的芜菁花叶病毒(TurnipMosaicVirus,TuMV)纯化繁殖于大白菜(小白口)及萝卜(长白品种)上。经约25天采收纯化繁殖的毒原材料,进行病毒粗提纯,并做病毒粒子的电镜观察。看到病毒粒体较为疏散清晰,丝状,长度多分布在720nm之间。另将接种TuMV的感病寄主有关部位,切成小块经固定、系列脱水、环氮树脂包埋后,制作超薄切片并用电镜观察,看到病叶、病茎和病根韧皮部细胞内,均有清晰的风轮状、环状及带状的内含体,这是马铃薯Y病毒组(Potyvirus)成员特征之一。
四种抗菌素Novobiocin、CoumermycinA、Oxolinicacid和Nalidixicacid以及化合物溴化乙锭(Ethidiumbromide)和ATP类似物γ—S—ATP能抑制噬菌体φ29DNA的细胞外包装。达到50%抑制作用的药物浓度(不包括ATP类似物)分别为每毫升5、90、167、380和1.3微克。当ATP类似物加入完全纯化的φ29胞外DNA包装系统时,DNA包装的中间产物积蓄,DNA包装流产,表明DNA装壳的整个过程均需ATP的参与。这一发现为抗病毒药物的研究提供另一条线索。本文并对φ29DNA包装的可能机制进行讨论。
壳粒是病毒的一个形态亚单位,它有规律地排列在二十面体衣壳内。壳粒的数目(N)是由三角形剖分数(T)规定的:N=10T+2,T=pf~2,这里f是整数,p是级数,p=h~2+hk十k~2(h和k是没有公因数的任意一对整数)。如果已知h,k和f,就可以推算出壳粒数N。
1985年我们研制了流行性出血热(EHF)抗体致敏的诊断血球,建立了检测EHF抗原的R-PHA方法。用此法检测本所分离的EHF病毒株感染的VeroE_6细胞培养上清液,以及人工感染EHFV的小白鼠乳鼠脑悬液等,均获得良好结果。以后又应用此法检测了EHF早期病人血清、白细胞冻融液及人工感染EHFV的小白鼠乳鼠血清等,并作了特异的EHF抗体阻断试验,现将结果报告如下:
Lee于1978年在南朝鲜分离到肾病综合征出血热病毒——Hantaan病毒后,我国病毒学者对HFRSV的分离、流行病学、血清学以及病毒形态学做了大量工作。近几年来国外用Hantaan病毒研究生化特征。研究病毒生化需要纯的病毒,针对HFRSV在细胞内复制周期较长,病毒产量低,我们用~3H—氨基酸对HFRSV进行细胞内标记,初步探索感染对细胞蛋白质合成的影响、标记的适当条件和标记HFRSV在病毒蛋白研究上的应用,现将结果报告如下:...
1983年7月,我们在围场县大面积的落叶松林地发现落叶松尺蠖(ErannisankerariaStaudinger)发生一种自然流行病,发病幼虫大量死亡。采集的病死幼虫经鉴定,确定其病原物为落叶松尺蠖核型多角体病毒(EaNPV),据现有资料,此病毒系国内外首次报道。现将该病毒的病征、病毒形态和组织病理观察结果总结如下。
鸡胚及鸡胚成纤维细胞(CEF)培养已广泛地用于病毒学研究及许多种病毒疫苗的生产。鸡胚及CEF培养中的潜在病毒感染可干扰病毒学研究及疫苗质量。禽网状内皮增生病病毒(REV)是在免疫学上不同于禽白血病病毒的一群逆转录病毒,该群病毒的成员可分别在火鸡、鸡、鸭等禽类引起肿瘤、免疫缺陷综合症、生长迟缓等病理变化。在美国的一些流行病学调查表明,将近20%的鸡群有REV感染,虽然由其引起的经济损失还不清楚。在江苏省调查的三个鸡场中,也发现有一个存在REV感染。
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