1989年04卷3期
一、引言受体这一概念最早是由著名化疗学家Ehrlich在1909年提出的。他认为受体是一些特殊的化学基因,能与某些药物发生结合,并初步提出了“锁与钥匙,(Key and Lock)学说。继后,许多学者深入进行了这方面的研究,均认为受体是一些特殊结构,能与环境中相对应的物质(称配体)发生特异结合并产生一定生物效应。受体有膜上和膜内之分,它与配体的结合如同底物和酶,抗原和抗体的结合一样,具有高度特异性,高度亲和力,可逆性及饱和性。七十年代以来,由于同位素、荧光素标记及亚细胞成分的分离纯化等新技术的应用,使受体研究有了重大突破,不仅对受体可进行定位研究,还可进行定量分析,有的已深入到分子水平。随着受体研究的深入,新的受体不断被发现,其应用也不断扩大。如通过激素受体的检测,对阐明某些肿瘤的病因,预测肿瘤的预后,为治疗的选择提供了可靠依据。
早在一百多年前已发现成年蜜蜂的“麻痹”症状,在蜂群中有一些成年蜜蜂表现异常,它们的翅与躯体颤抖不能飞翔,几天以后很快死亡。长久以来,许多学者认为蜜蜂麻痹病的病原体可能是病毒,但一直未得到证实。直到1963年,Bailey等才首先分离出两种蜜蜂麻痹病病毒,并用分离出来的两种病毒注射感染健康蜜蜂,几天内蜜蜂出现麻痹症状,失去飞翔能力。其中一种病毒感染的蜜蜂,出现颤抖症状,几天后死亡,作者称这种病毒为慢性蜜蜂麻痹病病毒(CBPV)。另一种病毒感染的蜜蜂出现麻痹症状后1～2天内很快死亡,称为急性蜜蜂麻痹病病毒(ABPV)。
小鼠感染Coxsackie B-3病毒后7天,各鼠心脏均出现巨检病变,组织学检查心肌细胞示变性、坏死及炎性细胞浸润,心肌切片作图象分析示病灶总面积/所测心肌总面积为11.3％,并有明显心肌超微结构改变。心肌中分离到病毒。对照鼠心脏均无上述改变,亦未分离到病毒。本模型可作为进一步探索病毒性心肌炎药物治疗的基础。
当前,克隆化探针(由病毒核酸片段和细菌质粒一载体组成)在临床样品的实验诊断和研究中得到了应用。它具有简便、快速、灵敏等优点,并有助于检测那些难于或不能培养的病毒。但是克隆化探针中载体与临床样品的同源性问题应引起重视。我们用常见的克隆载体pBR322作探针,用核酸点杂交和Southern吸印方法,检测了来自173人的213例样品。结果表明,在常用的临床样品:人宫颈脱落细胞、宫颈活检组织、血液中都含有pBR322 DNA的同源序列,这就意味着如果用克隆化探针检测这些临床样品时,可能出现样品与载体发生非特异性反应,而不是与病毒基因片段的特异性反应。实验还表明,经一次电泳纯化的病毒基因片段与pBR322探针杂交,阳性信号明显减弱,但没有完全消失,说明仍有少量pBR322污染。因此,在运用克隆化探针检测临床各类样品时,各系统要按常规设载体探针对照,或者用多次纯化的分离病毒基因片段作探针,以排除载体与临床样品的同源性问题。
用核酸限制性内切酶BamHI对单纯疱疹病毒2型(HSV—2)的DNA进行酶解,回收位于基因组中的反向重复序列区的Bam HIG片段,然后将其克隆在载体质粒PUC 8的Bam HI切点上,进一步用核酸限制性内切酶Eco RI和KPNI对这一重组质粒联合酶解,移去EcoRI—KPNI小片段,经末端修饰后,将其连接得到新的重组质粒pRC102,它含有一小段HSV—2的DNA序列。以此质粒为探针,分别与HSV—1、HSV—2及细胞DNA进行斑点杂交;与HSV—1和HSV—2酶解后的DNA片段进行Southern转印系交。两组实验结果显示,pRC102质粒DNA只与HSV—2 DNA特异性杂交,其HSV—2的型特异性良好。
用辣根过氧化物酶标记的抗日本脑炎病毒(JEV)种特异性单克隆抗体为结合物,建立了一种快速IgM抗体捕捉酶联免疫测定法(RMAC-ELISA),并初步用于乙脑的快速诊断,取得了良好的效果。该法通过用鞣酸预处理微板,提高反应温度,在稀释液中加入PEG并提高NaCl浓度,用鸡蛋清代替牛血清白蛋白或鸡血清,用自来水代替PBS作为洗液,用快速漱洗3次代替3×5分钟洗涤,用TMBS代替OPD底物,用酶标单克隆抗体代替多克隆结合物等措施,加快了反应速度,缩短了反应时间,简化了操作步骤,提高了敏感性,保证了特异性。从微板预处理至出结果,仅需1小时。由于该法具有简便、快速、特异、敏感等特性,不仅可以用于乙脑的早期诊断及实验室研究,还有可能推广到其它的免疫学检测方法中去。
本文报道150名HBsAg阴性产妇所生新生儿在实施计划免疫的同时,1、2组分别接种10μg、20μg乙肝疫苗,3组不接种乙肝疫苗,以了解乙肝疫苗与卡介苗、百白破联合免疫的免疫应答。结果表明:1.2组抗-HBc达到有效保护的(P/N≥5)为93.18％和89.58％,无显著差异;两组均未检出HBV标志物,但是未注射乙肝疫苗组HBV感染达6.67％。乙肝疫苗与卡介苗、百白破联合免疫应答是好的,抗原间无干扰,从而证明乙肝疫苗不但能有效地控制乙型肝炎,并能纳入扩大免疫规划。
本文报道了(s)—9—(2,3-dihydroxypropyl)adenine(简称(s)-DHPA)对流行性出血热(EHF)病毒J_(10)株感染小白鼠乳鼠的影响。实验表明,两个(s)-DHPA治疗组感染乳鼠的发病率(44.44％、55.17％)和感染率(44.44％、55.17％)均较对照组的发病率(83.33％)和感染率(86.96％)明显降低。实验结果提示,(s)-DHPA具有一定的抑制EHF病毒在小白鼠乳鼠体内复制的作用,为临床开发治疗EHF的抗病毒新药提供了实验室依据。
本文应用细胞培养、免疫荧光及电镜技术研究了B淋巴母细胞对EHF病毒的易感性。结果表明EHF病毒可在该细胞中增殖。感染细胞无明显细胞病变,在形态上与对照组无差别。虽然大部分感染细胞呈现明亮病毒抗原荧光,但在电镜下却难以找到完整的病毒颗粒,仅在扩张的囊泡中发现一些性质待定的微丝样物质。人B淋巴母细胞持续感染的建立,提示患者外周血中大量出现的异型淋巴细胞可能允许EHF病毒在其中复制。
33例新生儿急性胃肠炎的粪便标本经EM检测,12份(36.4％)粪便标本中检出了病毒样颗粒,其中11份(33,3％)为SRV样因子(SRV),1份为其他病毒样颗粒。经粪便包埋超薄切片和IEM证实SRV是引起新生儿急性胃肠炎的病原。SRV的直径为26nm,表面结构清晰。在氯化铯(CsCl)中的浮密度为1.361.40g/cm~3。应用微量CF试验,5例双份血清中的1例抗体有三倍升高,3例恢复期皿清抗补体,1例为阴性,该病人为其他病毒样颗粒感染。核酸电泳未显带。培养未见细胞病变。5例正常对照新生儿粪便未检出任何病毒样颗粒。
本文建立了一种较稳定、理想的人淋巴细胞体外诱导绵羊红细胞(SRBC)特异性抗体生成的系统。用SRBC体外刺激人扁桃体淋巴细胞,用溶血空斑法计数针对SRBC特异性抗体形成细胞。发现极低量抗原可诱导其抗体形成,抗体形成量随抗原量呈规律性变化;在抗原刺激后的第4天特异性抗体开始出现,第6天达高峰,并稳定维持至第8天;在辅助刺激剂美洲商陆(PWM)存在下,抗体形成量显著高于无PWM的情况;除去人扁桃体细胞中粘附细胞(主要是巨噬细胞)才能诱导最适抗体形成。将具感染性的HSV-1与SRBC一起加入淋巴细胞培养中,可显著抑制SRBC诱导的特异性抗体形成,这一抑制效应与病毒的感染量有关。此系统中同时加入α-干扰素则可部分解除病毒的抑制效应,并且解除效果与α-干扰素的剂量有关。
应用常规免疫双扩散不能鉴定马铃薯植株中的卷叶病毒(PLRV)。我们用微量玻片凝胶双扩散技术对马铃薯植株汁液中的PLRV进行了鉴定。试验说明,用这种方法可测出马铃薯茎的汁液最高稀释度为1:4,微量玻片凝胶双扩散与普通免疫双扩散灵敏度的比较试验表明,两者可测出提纯PLRV的最低浓度分别为1μg/ml和6μg/ml,但后者不能测出植物汁液中的PLRV。微量玻片凝胶双扩散是目前能够用于检测感病植物汁液中PLRV的最简便易行和可靠的血清学方法。
爪哇三七(Gynura aurantiaca D.C.)是柑桔裂皮病类病毒(Citrus Exocortis Vi-roid,简称CEV)敏感的指示植物。我们建立了健康和CEV感染的爪哇三七悬浮细胞培养的体外系统。绘制了悬浮细胞培养的生长曲线、pH曲线和温度曲线。CEV可以在悬浮细胞中复制。对继代培养中CEV和寄主核酸的连续测定表明CEV的扩增阻遏了寄主核酸的复制。
用人工组装的黄瓜花叶病毒卫星RNA生防制剂在烟草生产品种进行了田间保护试验。由于使用了生防制剂,经处理的烟草发病率降低84.9～86.4％,同时比对照早熟5天,上等烟比率增加151.3～173.5％,平均每亩收入增加43.3～65.7％。另外发现生防制剂能增强烟草对真菌病害的抵抗作用。
在湖北武昌芝麻上分离到的矮化坏死分离物(DNe-I)侵染芝麻引起严重矮化,叶片皱缩坏死。它能够摩擦接种侵染7科14种植物。在苋色藜、千日红上引起局部坏死斑,侵染油菜和百日菊引起系统花叶和黄化。DNe-I能够被桃蚜、花生蚜以非持久性方式进行传播。病毒体外稳定性状:存活期4天,钝化温度60～65℃,稀释限点4×10~(-4)。提纯病毒为线状粒体,长度为770nm。病毒外壳蛋自为单一亚基组成,分子量为30,700±600D。制备抗血清微量沉淀法测定其效价为1:256。在油菜病组织中,观察到风轮状及长直片层叠聚体类型的胞质内含体。在血清学性质上,该分离物与芜菁花叶病毒密切相关,与花生轻斑驳病毒和花生斑驳病毒弱相关,与大豆花叶病毒和西瓜花叶病毒不相关。基于上述性质,DNe-I被鉴定为芜菁花叶病毒。这是国内芜菁花叶病毒自然侵染芝麻的首次报道。
草鱼出血病病毒感染鱼肾(Clk)单层细胞后,产生明显的细胞病变,其繁殖周期为2—3天。病毒增殖的上升期在感染后的12—48小时。28℃下,当感染复数(Multiplicityof Infection简称MOI)为0.05PFU/cell时,病毒滴价可达1.78×10~(11)PFU/ml,不同温度(25℃、28℃、30℃)下通气培养,测定病毒滴价略有差异。感染病毒的细胞培养液经ELISA检测和电子显微镜观察均为阳性结果,并且能感染健康草鱼。
本文报告了小剂量α-干扰素配伍聚肌胞治疗慢性乙型活动性肝炎的效果。将在我院1986-1988年住院的40例乙型慢活肝患者,随机分为试验组与对照组各20例。试验组应用小剂量α-干扰素加聚肌胞,对照组仅用对症及支持疗法。经三个月观察:试验组总有效率为75％,对照组仅为25％。两组有显著差异;P<0.01。在HBsAg及HBeAg的系统转换上,试验组办较对照组为优,有显著差异。
红棕灰夜蛾 Sarcopolia illoba(Butler)是鳞翅目夜蛾科害虫。分布于我国东北、华北、华东、华中及苏联、日本、朝鲜、印度等地。幼虫多食性,为害烟草、甘蓝、马铃薯、甜莱、大豆、豌豆、菜豆等作物。1984年在哈尔滨大豆田中,从该虫幼虫自然死虫体内分离出一株核型多角体病毒。我们对该病毒的形态学进行了观察。这种病毒在国内外尚未见报道。并对12种夜蛾科害虫:迹幽夜蛾(Discestra stigmosa)、甘蓝夜蛾(Mamestra brassicae)、黄地老虎(Scotia segetum)、小地老虎(S.ipsilon)、银纹夜蛾
39卷第1期 (2024年2月)
ISSN 1674-0769
EISSN 1995-820X
CN 42-1760/Q
主编: 石正丽
影响因子: 5.5*
*源于2022年JCR
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