1994年09卷2期
马立克氏病(Marek s diseas~，MD)是一种具有高度传染性 淋巴组织增生性疾病，病理上以
外周神经、性腺、虹膜、各种脏器、肌肉和皮肤发生单核细胞浸润为特征。本病既是危害世界养
禽业最严重的传染病之一，又是世界上第一个用疫苗预防病毒性肿癌获得成功的范倒，因而
加强对本病的研究不仅有助于促进养禽业发展，而且也可为探索病毒致瘤机制、预防和控制
肿瘤性疾病提供理想模型，故世界各国都很注重对本病的研究。
本文首次采用ＳＰ（６５）特殊质粒与人类的乙型肝类病毒ＤＮＡ（ＨＢＶＤＮＡ）重组，制备了Ｂｉｏ－ＨＢＶＲＮＡ探针，能特异地与ＨＢＶＤＮＡ杂交。将该探针与缺口转移（ＮｉｃＨｒａｎａｌａｔｉＯｎ）方法标记的ｍ小ＨＢＶＤＮＡ探针进行了比较。结果显示出Ｂｉｏ－ＨＢＶＲＮＡ探针比Ｂｉｏ－ＨＢＶＤＮＡ探针的敏感性提高１０倍。并分别应用两种探针同时检测７０例己肝病人血清中ＨＢＶＤＮＡ，阳性率各为３１．４２％、２８．５７％（Ｐ＞０．２５）．对Ｂｉｏ－ＨＢＶＲＮＡ探针应用于临床检测乙肝病毒ＤＮＡ的效能也进行了初步探讨。
本文采用间接免疫荧光法（ＩＦ），ＲＰＨＡ法，ＥＬＩＳＡ法及斑点杂交技术检测１０例无症状ＨＢ－ｓＡｇ携带者及８９例乙肝病人尿细胞中的ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及ＨＢＶＤＮＡ，发现尿细胞中有ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ存在。结果提示：乙肝无症状携带者及乙肝病人尿细胞中具有ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ，因此更进一步证实尿液具有传染性。
本文报道一种能对ＨＰＶ进行较为准确分型的刚Ａ杂交程序和方法。它具有如下特点：１．由于简化了实验程序，标本消耗减少。因此该方法尤其适用于小组织活检标本（１－２ｍｇ）中ＤＮＡ同源序列检测；２．敏感性高。由于标本消耗减少，使ＨＰＶ检出率大为提高，与斑点杂交技术相比，敏感性提高１．６倍；３．型别特异性强。由于改变了实验条件及在实验过程中实行严格的质量控制，明显减少了不同ＨＰＶ型别的交叉反应，甚至在部分出现交叉反应的标本中，仍可通过强度对比来最后判定ＨＰＶ感染型别。应用该技术对１４３份宫颈炎标本、１７份宫颈不典型增生标本及２５份宫颈癌标本进行了ＨＰＶ１６型检测，阳性率分别为５０．０５％（７３／１４３）、５７％（２７／４７）及７６％（１９／２５），并与Ｄｏｔｂｌｏｔ方法进行了比较。该方法在ＨＰＶ感染与宫颈癌关系的分子流行病学研究中具有重要意义和广阔的应用前景。
本文以２．２．１５细胞株为模型，以ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ、细胞存活率为观察指标，综合评价了喹诺酮类药物吡哌酸（ＰｉｐｅｍｉｄｉｃＡｃｉｄ）、氟哌酸（Ｎｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ）、环丙氟哌酸（Ｃｉｐｒｏｆｌｏｓｘａｃｉｎ）、氟嗪酸（Ｏｆｌｏｘａｃｉｎ）体外抗ＨＢＶ效果。结果表明：吡哌酸、氟哌酸、环丙氟哌酸、氟嗪酸对ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ５０％抑制浓度（ＩＤ＿（５０））分别为１１ｇ／ｍｌ、６４ｇ／ｍｌ、９３ｇ／ｍｌ、１０５ｇ／ｍｌ和１９９ｇ／ｍｌ、１１１ｇ／ｍｌ、２４ｇ／ｍｌ、２１７ｇ／ｍｌ，细胞存活率为５０％时的药物浓度（ＣＤ＿（５０））分别为２１９ｇ／ｍｌ、９０ｇ／ｍｌ、１８１ｇ／ｍｌ、１６９ｇ／ｍｌ，在所选定的用药浓度范围内不同程度抑制培养上清液及细胞内ＨＢＶＤＮＡ及其复制中间体的产生。尤其对超螺旋结构ＤＮＡ（ｓｃＤＮＡ）有不完全抑制作用。
利用源自ＮＳ ５和５－ＵＴＲ引物进行丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ基因片段的逆转录－套式多聚酶链反应（ＲＴ－ｎｅａｔｅｄＰＣＲ）检测。对３５例随机选择的抗ＨＣＶＡｂ（＋）血清的检测结果表明，两种引物检测结果的敏感性无显著性差别。利用ＮＳ５区引物扩增的片段可与５种不同型别的ＨＣＶＲＮＡ亚基因探针很好地结合和显色，说明ＮＳ５基因可以利用于ＨＣＶＲＮＡ的基因分型。对１３１例抗ＨＣＶＡｂ（＋）血清进行了ＮＳ５基因检测，检出率为５２．６８％（６９／１３１），其小，除ＨＣＣ和ＣＲＦ组检出率分别为１６．６７％和３４．６８％，其余各组均在５０～８０％之间。献血组、献浆组和免疫球蛋白中ＨＣＶＲＮＡ的检出率分别为６６．６１％，５４．４５％和５７．１４％，说明应用未经筛查的血液及血制品小有很高的感染危险性，２２例抗ＨＣＶＡｂ（－）ＮＡＮＢＨ患者中有８例第２次ＰＣＲ后确证为ＨＣＶＲＮＡ（＋），表明１／３与低水平的ＨＣＶ感染有关。
本文采用套式ＰＣＲ（Ｎｅｓｔｅｄｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ）技术对６１例婴儿肝炎综合征（Ｎｅｏｎａｔａｌｈｅｐａｔｉｔｉｓ）患者进行了ＨＣＭＶ（Ｈｕｍａｎｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ）检测，结果表明，当只用一对引物进行ＰＣＲ时，检出３３例患者为ＨＣＭＶ阳性，阳性检出率为５４．１％；而采用套式ＰＣＲ后，有１７例为ＨＣＭＶ阳性，阳性检出率提高到７７．０％。可见套式ＰＣＲ方法的阳性检出率明显高于单一ＰＣＲ，并远高于目前使用的其它方法。同时也说明ＨＣＭＶ是导致肝炎综合征的主要病原体之一。此外，灵敏性和特异性试验表明，套式ＰＣＲ技术的敏感度高、特异性强、简单快速，在临床检测和诊断中具有很大的潜力。
用ＰＣＲ技术成功地扩增了苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒（ＡｃＮＰＶ）的衣壳主蛋白基因（ｖｐ３９基因），并克隆了该基因，利用纯的ｖｐ３９基因探针，在低严谨杂交条件下，已将粘虫核型多角体病毒（ＬｓＮＰＶ）的ｖｐ３９基固定位在ＰｓｔＩ－Ｆ，ＢａｍＨＩ－Ｃ，ＥｃｏＲＩ－Ｃ，ＸｈｏＩ－Ｄ，Ｉ，ＥｃｏＲＶ－Ｈ，Ｘ等片段上。ＰＣＲ反应时，在扩增出预期的包括完整ｖｐ３９基因的１４０６ｂｐ片段的同时也扩增出一条Ｃａ．４００ｂｐ的片段，本文讨论了ＰＣＲ的特异性扩增和非特异性扩增。
应用５００、１５００单位人体注射用的盐酸四环素和青霉素Ｇ钾浸渍处理龙眼鬼帚病苗，均无抑制病状表现，表明本病不是由ＭＬＯ和ＢＬＯ引起的；电镜观察仅在病叶组织筛管细胞内见到成束分布在细胞质内的线状病毒粒体；通过Ａ蛋白。免疫电镜检测，亦可在龙眼鬼帚病介体昆虫荔枝蝽（ＴｅｓｓａｒａｔｏｍａｐａｐｉｌｌｏｓａＤｒｕｒｙ）、龙眼角颊木虱（ＣａｒｎｅｇｅｎａｐｓｙｌｌａｓｉｎｉｃａＹａｎｇｅｔＬｉ）唾液腺内捕获到与病叶组织相同的病毒粒体，从而进一步肯定本病病原的病毒性质。
从南京郊区田间番茄坏死病株中分离出黄瓜花叶病毒ＴＮ分离物，经人工接种１０科３９种植物，能侵染其中的８科２６种，接种番茄，辣椒和普通烟都引起坏死症状。ＴＮ分离物的失毒温度为５０℃，稀释限点５１０（－３）－５１０（－４），体外存活期１－２天。蚜虫以非持久性方式传毒，经免疫双扩散测定，ＴＮ分离物与黄瓜花叶病毒抗血清呈阳性反应。用差速离心提纯的病毒粒子经电镜观察为廿面体，直径为２８ｎｍ。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析病毒外壳蛋白为单一组份，分子量２７５００Ｄ。病毒核酸组份分析发现，该病毒分离物含有ＣＭＶ基因组核酸和一个低分子量的卫星ＲＮＡ。以上结果同已报道的引起番茄坏死的带卫星ＲＮＡ的黄瓜花叶病毒株系一致（Ｋｅａｒｎｅｙ，Ｃ．Ｍ．１９９０；Ｊｏｒｄａ，Ｃ．１９９２）。本文还讨论了该病害的发生和流行。
用嫁接方法将甘薯羽状斑驳病毒（ＳＰＦＭＶ）接种到Ｉ．ｓｅｔｏｓａ上扩繁，以０．２ｍｏｌ／ＬｐＨ７．２ＰＢＫ缓冲液、垫层差速离心、蔗糖密度梯度离心提取纯化ＳＰＦＭＶ。纯化的ＳＰＦＭＶＯＤ２６０／２８０的比值为１．２５。将纯化的ＳＰＦＭＶ免疫家兔制备抗血清，在环状沉淀和微量沉淀试验中，用提纯病毒测定抗血清的效价均为１：４０９６；以ＳＰＦＭＶ－ＩｇＧ为第一抗体，应用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ对甘薯和Ｉ．ｓｅｌｏｓａ叶片中的ＳＰＦＭＶ分别作了测定。
将草鱼出血病病毒（ＧｒａｓｓＣａｒｐＨｅｍｏｒｒｈａｇｅＶｉｒｕｓ，ＧＣＨＶ）置于还原性的溶液中，然后加入等体积的ＮａＨＣＯ３配制的异硫氰酸荧光索溶液进行多肽的标记，再经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，在紫外灯下即可检测到ＧＣＨＶ全部的１１个结构多肽的荧光带。该方法最小检测量为５００ｎｇ，由该方法回收的多肽具有抗原活性，可作为抗原进行免疫学实验。
人工合成错位双链ＲＮＡ（ａｍｐｌｉｇｅｎ）是一种已知的干扰素诱导剂。单独和或与其它抗病毒药物联合使用治疗鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）阳性鸭。这些药物包括丙氧鸟苷（ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ）和原核细胞ＤＮＡ促旋酶Ｂ抑制物（ｃｏｕｍｅｒｍｙｃｉｎＡｌ）。单独和／或联合该两种药物时，对鸭血清和肝组织内ＤＨＢＶ均有抑制作用，但以三种药物联合时抑制效果最好。上述下种方案治疗结束后肝内松弛环状ＤＮＡ（ＲＣ）和超螺旋ＤＮＡ（ＳＣ）持续存在，而且不能消除血中鸭乙肝表面抗原（ＤＨＢｓＡｇ）。对治疗的大多数鸭血清干扰素，测定结果表明，ａｍｐｌｉｇｅｎ能诱生鸭干扰素，但其出现时间与抗病毒效果产生没有平行关系。本研究为人慢性乙型肝炎治疗合理使用抗病毒药物和免疫诱导剂提供了参考。
从人工养殖生长比较缓慢的对虾与病虾的肝胰腺和消化道中，分离出一种大小为８０ｎｍ的球状病毒。同时采用超薄切片技术可在对虾中肠细胞中发现大量的球状病毒，这些病毒聚集成片，在同一细胞内的细胞器，如线粒体等均发生病变。此外，将分离提取的球状病毒进行感染试验，感染死亡率为６０％。并且从感染致死的对虾消化腺及肠道中，同样可以观察到大小相同、形态一致的球状病毒颗粒。
本文根据正廿面体病毒具有５：３：２旋转对称轴特性，分别计算出各条对称轴的轴长，并相应推导出：这里ａ５，ａ３和ａ２分别是５－，３－和２－重轴的长度，ｌ是任意两相邻壳粒间的距离，Ｔ是三角形剖分数。同时对已报道过的又采用新的方法给予推导和验证，这里，是病毒等效球的平均半径。通过上述公式深入地揭示了病毒的大小、轴长与三角形剖分数和壳粒间距之间的关系。
番木瓜环斑病毒（ＰＲＶ）提纯的研究高文通（黄埔动植物检疫局，广州５１０７００）高乔婉，范怀忠（华南农业大学植保系，广州５１０６４２）关键词番木瓜环斑病毒，病毒提纯四十年代末，美国首次报道的番木瓜环斑病（ＰａｐｅｙａＲｉｎｇｓｐｏｔＶｉｒｕｓ，ＰＲＶ）...
39卷第1期 (2024年2月)
ISSN 1674-0769
EISSN 1995-820X
CN 42-1760/Q
主编: 石正丽
影响因子: 5.5*
*源于2022年JCR
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