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1994年09卷3期

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Review

绵羊进行性肺炎分子生物学研究进展

丁恩雨

1994, 9(3): 183

黄瓜花叶病毒的株系鉴定研究进展

李华平, 胡晋生, 范怀忠

1994, 9(3): 187

黄瓜花叶病毒(Cucumber Mosaic Virus,CMV)是黄瓜花叶病毒组中的典型成员。最早是由 Doolitte(1916)和Jagger(1916)报道为黄瓜花叶病的病原。随后发现此病毒具有极广的寄主范 日,天然寄主有67科、470种植物,加上人工接种的共有85科、365屑、775种植物。

白纹伊蚊和埃及伊蚊对基孔肯雅病毒的易感性和传播性的研究

张海林, 米竹青, 张云智

1994, 9(3): 195

用4株基孔肯雅病毒经口感染白纹伊蚊和埃及伊蚊,进行了易感性和传播性的研究。结果表明,这两种蚊虫对基孔肯雅病毒易感。无论白纹伊蚊或埃及伊蚊,感染后第5-6天即可通过吸血将病毒传播给乳鼠,至第8-13天,传播率可高达55.55%-100%。感染蚊亦可经叮咬将病毒传播给小鸡。埃及伊蚊的易感性和传播率高于白纹伊蚊。实验还发现,不同来源毒株之间存在一定差异,如分离自云南白纹伊蚊的M81株的感染率和传播率均高于其它毒株。这些结果表明,白纹伊蚊和埃及伊蚊在基孔肯雅病毒的保存和传播中起重要作用。

CM2细胞株及其类c型逆转录病毒的电镜观察

洪明理, 蓝祥英, 付治锋, 李云生, 曾毅, 童洁, 任家强, 章东, 冯子敬, 张永利, 王得新

1994, 9(3): 201

本文报告了CM_2细胞的超微结构及其所携带的C型病毒颗粒形态和形态发生。细胞大小约7-15μm,细胞及其核的多形性具有恶性淋巴细胞特征。在细胞外和细胞内扩张的内质网地中可见大量C型病毒颗粒。病毒颗粒大小约68.1-94.3nm,平均81.2nm。细胞外的病毒颗粒多数具有大小、形态各异的致密核芯,而在内质网池中病毒颗粒的核芯多数呈低密度。病毒颗粒从细胞膜通过芽生方式形成。

用PCR方法证实HIV-I感染性病毒颗粒携带有前病毒DNA

董关木

1994, 9(3): 206

用多聚酶链反应(PCR)为检测手段,证明了成熟的人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)可携带前病毒DNA;用细胞病毒裂解液处理病毒样品或在病毒样品中只加磷酸盐缓冲液(PBS)代替细胞裂解液,结果发现只有病毒裂解液处理样品后才能检测到特异DNA.完整的病毒颗粒对DNA酶不敏感,而只有在病毒裂解以后才能对DNA酶敏感。当靶细胞膜上的CD_4受体被特异的单克隆抗体覆盖后不能吸附病毒时,DNA也不能被检测到,而且DNA的数员和病毒滴度的高低相一致。这些证据都提示这种和病毒相关的DNA存在于完整的有感染性的成熟病毒颗粒内部。

戊型肝炎病毒细胞分离株部分核苷酸序列分析

陈万荣, 田辛, 鲍作义, 李敬云, 邓大荣

1994, 9(3): 213

用抗原捕获/多聚酶链反应(AC/PCR)对戊型肝炎病毒(HEV)细胞分离株MJ90和R25基因组的部分核苷酸序列进行扩增,获得了与HEV缅甸株ET1·1相同的cDNA扩增带。该cDNA扩增带纯化后用双脱氧核苷酸DNA链末端终止法测序,CJ90、R25株的核苷酸和氨基酸序列与ET1·1克隆的同源性分别为99.6%、100%和99%、99%,从而证明MJ90和R25毒株为HEV.

黄地老虎颗粒体病毒DNA片段的克隆与颗粒体蛋白基因的定位

陈东, 谢天恩, 金锋

1994, 9(3): 217

用pUC19质粒作载体,克隆了黄地老虎颗粒体病毒(Agrolissegetumgranulosisvirus,简称AsGV)DNAPstI-D.E.F.G.H.J.K.等7个片段。以[ ̄(32)P]-dCTP标记的油桐尺蠖核型多角体病毒(Buzurasuppressarianuclcarpolyhedrosisvirus简称BsNPV)多角体蛋白基因为探针,在37℃条件下对AsGV)颗粒体蛋白基因进行了定位,将其分别定位于BslⅡ-S或TPsTI-A或B和EciRI-A片段上。

中国南瓜曲叶双生病毒的生物学、血清学和分子杂交的研究

蔡健和, 洪益国, 黄福新, 王小凤, 田波

1994, 9(3): 222

从广西南宁市的南瓜上分离到一株可经烟粉虱(Bemisiatabaci)传播的南瓜曲病毒,它可侵染南瓜(Cucurbitamoschata)和西葫芦(C.pepo)引致叶片卷曲和严重矮化的症状。ELISA测定表明,其病叶粗提液与非洲木薯花叶病毒(ACMV-K)单克隆抗体SCR18呈强阳性反应,与SCR11呈较弱的阳性反应,而与SCR23呈阴性反应;与印度木薯花叶病毒(ICMV)单克隆抗体SCR56和SCR66呈强阳性巨应,与SCR62呈弱阳性反应,但与SCR52呈阴性反应。分子杂交试验进一步证实中国南瓜曲叶病的病原是南瓜曲叶双生病毒。

茄子花叶病新毒原

王振东, 房德纯, 刘玉乐, 田波

1994, 9(3): 226

1991年从沈阳地区茄子花叶病叶片中分离到了SY-Is分离物。经汁液摩擦接种7个科16种植物,这一分离物可浸染4个科8种植物,但不侵染黄瓜、两葫芦和蚕豆,也不能经桃蚜和萝卜蚜传播。该分离物体外抗性的致死温度(TIP)为90-95℃;稀释限点(DEP)为10 ̄(-6)-10 ̄(-7);体外保毒期(L)为一个月以上。光学显微镜下可见晶状胞质内含体。叶滴法电镜观察可见大小为±300×18nm的杆状病毒粒子。该病病叶汁液与烟草花叶病毒(TMV)普通株抗血清呈明显阳性反应。用TMV的一对引物进行多聚酶链反应(PCR),可扩增出一特异性核酸片段。根据上述实验结果,我们认为引起沈阳地区茄子花叶病的毒原种类为TMV,是茄子花叶病的新毒原。

豆科植物上分离的黄瓜花叶病毒(CMV)五个分离物的比较研究

周雪平, 濮祖芹, 方中达

1994, 9(3): 232

从豌豆、扁豆、菜豆和赤豆分离到五个CMV分离物,除寄主反应及核酸组分外,5个分离物在体外抗性、蚜虫传毒、提纯病毒粒体形态和稳定性、衣壳蛋白分子过和病毒粒体迁移率等方面无明显差异.在琼脂糖双扩散试验中五个分离物与CMV抗血清形成的沉淀线相互融合,在A蛋白双抗体夹心ELBA测定中,也无明显差异。根据在四种豆科植物上的症状反应,五个分离物可归为两个型:Ⅰ型在豌豆、蚕豆、菜豆和豇豆上产生局部枯斑症状;Ⅱ型在这四种植物上产生系统症状。五个分离物中,CMVP_2含有五个枝酸组分,其它分离物为四个组分,即CMVP_2可能含有卫星RNA.

温州蜜柑萎缩病毒和柑桔衰退病毒在苗木各部位分布的全年分析

周常勇, 赵学源, 蒋元晖

1994, 9(3): 239

1991年9月至1992年8月逐月采样,采用DAS-ELISA法对温州蜜柑萎缩病毒(SDV)在温州蜜柑苗木各部位及对柑桔衰退病毒(CTV)在甜橙苗木各部位的分布进行了全年分析。结果表明SDV在老叶、老枝皮中全年均检测不到;在根中仅在7、8月份可检出有少显病毒存在;在嫩叶中3、4、5、6、9、10月均可检出且浓度较高,而7、8月在嫩叶中检测不出,在嫩枝皮中4、5、6、7、10月均可检出而7月份浓度有较大幅度降低。这说明冷凉温度下的嫩组织适立于SDV的繁殖,最佳检测时期为春梢和秋梢的嫩梢期,最佳检测部位为幼嫩的叶和嫩枝皮。对CTV在甜橙苗木各部位分布检测结果表明各部位全年均可检测出带毒且含量均较高,总的变幅不大,冬季和夏季含量有所下降,在老叶中变幅稍大些,这说明甜橙苗木各个部位均适宜于采样且全年均可进行分析。

宁夏甜菜的烟草环斑病毒的鉴定

薛翠峰, 周履谦, 赵林, 白生海, 张蓉

1994, 9(3): 245

从宁夏患丛根病甜菜的病根中分离到一种球状病毒粒子,直径约为28nm。提纯病毒的紫外扫描呈典型的核蛋白曲线,最大吸收为260nm,最小吸收为240nm,A_(260)/A_(280)=1.30。寄主范围广,能侵染茄科、豆科、藜科、葫芦科、番杏科等17种植物。病毒的TDP为65℃,DEP为10 ̄(-3),体外存活期6-7天。有较强的免疫原性。病毒的抗血清与烟草环斑病毒(TRSV)之间产生明显的沉淀线。经初步鉴定认为该分离物是烟草环斑病毒。

植物组织粗汁液中的番木瓜环斑病毒的ELISA检测技术

肖火根, 范怀忠

1994, 9(3): 249

本研究建立和改进了检测番木瓜和西葫芦组织粗汁液里的番木瓜环斑病毒(PRV)的DAC-ELISA法和Dot-ELISA法。用不同的ELISA方法来检测不同寄主植物粗汁液里的PRV,其所用的合适的制备粗汁液的缓冲液是不同的。用DAC-ELISA法检测西葫芦粗汁液时,以0.5mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.5,内含0.1mol/L乙二胺四乙酸二钠)为宜;而检测番木瓜粗汁液时,则还要加入0.25mol/L脲。用Dot-ELISA法检测时,在上述磷酸盐缓冲液中加入2%聚乙烯吡咯烷铜能提高对西葫芦粗汁液的检测效果。应用合适的制备粗汁液的缓冲液,DAC-ELISA法和Dot-ELISA法的灵敏度分别提高到1/4096和1/1024(稀释度)。本研究还表明,影响DAC-ELISA法的定过测定的主要因素是粗汁液的稀释度和包被液(0.05mol/L碳酸盐缓冲液,pH9.6)的用过。在较高粗汁液稀释度和包被液的用量相同时,粗汁液里的病毒含量与DAC-ELISA法的OD492nm值呈真实的线性关系。

犬传染性肝炎病毒在体外细胞质内的发生

常国权, 杨盛华

1994, 9(3): 256

通过对犬传染性肝炎病毒(ICHV)在犬肾传代细胞内形态发生及其抗原定位的电镜和免疫胶体金电镜研究,发现ICHV除了在宿主细胞核内发生外,还有一条细胞质内的发生途径。在细胞质内病毒核壳体的装配是以均质致密包涵体和副晶格包涵体为“基地”,这与人们熟知的细胞核内形态发生方式相似。免疫胶体金标记显示,细胞质包涵体中含有大量的ICHV抗原成分,显核壳体在细胞质内装配病毒的结构蛋白来源。此外,在感染的细胞质内还观察到与核内相同的病毒核心样结构。

HBV-DNA的·PCR二步法扩增及其快速检测

方勤, 吴云涛, 蔡宜权

1994, 9(3): 261

HBV-DNA的PCR二步法扩增及其快速检测方勤,吴云涛,蔡宜权(中国科学院武汉病毒研究所,武汉430071)关键词HBV-DNA,二步温控PCR,Southern杂交,生物素寡聚核苷酸杂交乙型肝炎是危害人类健康的主要疾病之一,其病原常用的检测方法多...

中国南瓜曲叶双生病毒的生物学、血清学和分子杂交的研究

蔡健和, 洪益国, 黄福新, 王小凤, 田波

1994, 9(3): 266

从广西南宁市的南瓜上分离到一株可经烟粉虱(Bemisiatabaci)传播的南瓜曲病毒,它可侵染南瓜(Cucurbitamoschata)和西葫芦(C.pepo)引致叶片卷曲和严重矮化的症状。ELISA测定表明,其病叶粗提液与非洲木薯花叶病毒(ACMV-K)单克隆抗体SCR18呈强阳性反应,与SCR11呈较弱的阳性反应,而与SCR23呈阴性反应;与印度木薯花叶病毒(ICMV)单克隆抗体SCR56和SCR66呈强阳性巨应,与SCR62呈弱阳性反应,但与SCR52呈阴性反应。分子杂交试验进一步证实中国南瓜曲叶病的病原是南瓜曲叶双生病毒。

PCR在慢性宫颈炎HSV感染研究中的应用

蔡红, 姚堃, 季晓辉, 周瑶玺

1994, 9(3): 272

单纯疱疹病毒(HsV)被认为与宫颈癌有关。目前生殖道HSV感染日渐升高,日益引起人 们的重视。由于药物治疗HSV感染有效,因而迫切需要一种简便、快速、有效的检测方法。以 此为目的,我们用细胞裂解法结合FCR技术,检测了102份临床宫颈拭子中HSV—DNA,并与 病毒分离、McAb-ELISA夹心法进行了比较,获得了满意结果,现报告如下。

鸭乙型肝炎病毒复制复合体(DHBV RCs)的提纯及其对外源模板的利用

邵兴无, 陶佩珍, 郭巨涛, 陈鸿珊

1994, 9(3): 275

Duck hepatitis B virus re plicativc complexe~ (DHBV RCs)wcl~e isol~ted from DI-~V—infected duck liver by chromato~aphy thxou Bio--Oel A 5m followed crose gradient centrifugation.The feIathe endogenous DNA polymcra.se activity of the purified RCs was 100 tim es higher than that of the unchromatosraphed one,confirmed by detecting their DHBcAg with Dot-EIA method.