1994年09卷3期
黄瓜花叶病毒(Cucumber Mosaic Virus，CMV)是黄瓜花叶病毒组中的典型成员。最早是由
Doolitte(1916)和Jagger(1916)报道为黄瓜花叶病的病原。随后发现此病毒具有极广的寄主范
日，天然寄主有67科、470种植物，加上人工接种的共有85科、365屑、775种植物。
用４株基孔肯雅病毒经口感染白纹伊蚊和埃及伊蚊，进行了易感性和传播性的研究。结果表明，这两种蚊虫对基孔肯雅病毒易感。无论白纹伊蚊或埃及伊蚊，感染后第５－６天即可通过吸血将病毒传播给乳鼠，至第８－１３天，传播率可高达５５．５５％－１００％。感染蚊亦可经叮咬将病毒传播给小鸡。埃及伊蚊的易感性和传播率高于白纹伊蚊。实验还发现，不同来源毒株之间存在一定差异，如分离自云南白纹伊蚊的Ｍ８１株的感染率和传播率均高于其它毒株。这些结果表明，白纹伊蚊和埃及伊蚊在基孔肯雅病毒的保存和传播中起重要作用。
本文报告了ＣＭ＿２细胞的超微结构及其所携带的Ｃ型病毒颗粒形态和形态发生。细胞大小约７－１５μｍ，细胞及其核的多形性具有恶性淋巴细胞特征。在细胞外和细胞内扩张的内质网地中可见大量Ｃ型病毒颗粒。病毒颗粒大小约６８．１－９４．３ｎｍ，平均８１．２ｎｍ。细胞外的病毒颗粒多数具有大小、形态各异的致密核芯，而在内质网池中病毒颗粒的核芯多数呈低密度。病毒颗粒从细胞膜通过芽生方式形成。
用多聚酶链反应（ＰＣＲ）为检测手段，证明了成熟的人免疫缺陷病毒１型（ＨＩＶ－１）可携带前病毒ＤＮＡ；用细胞病毒裂解液处理病毒样品或在病毒样品中只加磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）代替细胞裂解液，结果发现只有病毒裂解液处理样品后才能检测到特异ＤＮＡ．完整的病毒颗粒对ＤＮＡ酶不敏感，而只有在病毒裂解以后才能对ＤＮＡ酶敏感。当靶细胞膜上的ＣＤ＿４受体被特异的单克隆抗体覆盖后不能吸附病毒时，ＤＮＡ也不能被检测到，而且ＤＮＡ的数员和病毒滴度的高低相一致。这些证据都提示这种和病毒相关的ＤＮＡ存在于完整的有感染性的成熟病毒颗粒内部。
用抗原捕获／多聚酶链反应（ＡＣ／ＰＣＲ）对戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）细胞分离株ＭＪ９０和Ｒ２５基因组的部分核苷酸序列进行扩增，获得了与ＨＥＶ缅甸株ＥＴ１·１相同的ｃＤＮＡ扩增带。该ｃＤＮＡ扩增带纯化后用双脱氧核苷酸ＤＮＡ链末端终止法测序，ＣＪ９０、Ｒ２５株的核苷酸和氨基酸序列与ＥＴ１·１克隆的同源性分别为９９．６％、１００％和９９％、９９％，从而证明ＭＪ９０和Ｒ２５毒株为ＨＥＶ．
用ｐＵＣ１９质粒作载体，克隆了黄地老虎颗粒体病毒（Ａｇｒｏｌｉｓｓｅｇｅｔｕｍｇｒａｎｕｌｏｓｉｓｖｉｒｕｓ，简称ＡｓＧＶ）ＤＮＡＰｓｔＩ－Ｄ．Ｅ．Ｆ．Ｇ．Ｈ．Ｊ．Ｋ．等７个片段。以［￣（３２）Ｐ］－ｄＣＴＰ标记的油桐尺蠖核型多角体病毒（Ｂｕｚｕｒａｓｕｐｐｒｅｓｓａｒｉａｎｕｃｌｃａｒｐｏｌｙｈｅｄｒｏｓｉｓｖｉｒｕｓ简称ＢｓＮＰＶ）多角体蛋白基因为探针，在３７℃条件下对ＡｓＧＶ）颗粒体蛋白基因进行了定位，将其分别定位于ＢｓｌⅡ－Ｓ或ＴＰｓＴＩ－Ａ或Ｂ和ＥｃｉＲＩ－Ａ片段上。
从广西南宁市的南瓜上分离到一株可经烟粉虱（Ｂｅｍｉｓｉａｔａｂａｃｉ）传播的南瓜曲病毒，它可侵染南瓜（Ｃｕｃｕｒｂｉｔａｍｏｓｃｈａｔａ）和西葫芦（Ｃ．ｐｅｐｏ）引致叶片卷曲和严重矮化的症状。ＥＬＩＳＡ测定表明，其病叶粗提液与非洲木薯花叶病毒（ＡＣＭＶ－Ｋ）单克隆抗体ＳＣＲ１８呈强阳性反应，与ＳＣＲ１１呈较弱的阳性反应，而与ＳＣＲ２３呈阴性反应；与印度木薯花叶病毒（ＩＣＭＶ）单克隆抗体ＳＣＲ５６和ＳＣＲ６６呈强阳性巨应，与ＳＣＲ６２呈弱阳性反应，但与ＳＣＲ５２呈阴性反应。分子杂交试验进一步证实中国南瓜曲叶病的病原是南瓜曲叶双生病毒。
１９９１年从沈阳地区茄子花叶病叶片中分离到了ＳＹ－Ｉｓ分离物。经汁液摩擦接种７个科１６种植物，这一分离物可浸染４个科８种植物，但不侵染黄瓜、两葫芦和蚕豆，也不能经桃蚜和萝卜蚜传播。该分离物体外抗性的致死温度（ＴＩＰ）为９０－９５℃；稀释限点（ＤＥＰ）为１０￣（－６）－１０￣（－７）；体外保毒期（Ｌ）为一个月以上。光学显微镜下可见晶状胞质内含体。叶滴法电镜观察可见大小为±３００×１８ｎｍ的杆状病毒粒子。该病病叶汁液与烟草花叶病毒（ＴＭＶ）普通株抗血清呈明显阳性反应。用ＴＭＶ的一对引物进行多聚酶链反应（ＰＣＲ），可扩增出一特异性核酸片段。根据上述实验结果，我们认为引起沈阳地区茄子花叶病的毒原种类为ＴＭＶ，是茄子花叶病的新毒原。
从豌豆、扁豆、菜豆和赤豆分离到五个ＣＭＶ分离物，除寄主反应及核酸组分外，５个分离物在体外抗性、蚜虫传毒、提纯病毒粒体形态和稳定性、衣壳蛋白分子过和病毒粒体迁移率等方面无明显差异．在琼脂糖双扩散试验中五个分离物与ＣＭＶ抗血清形成的沉淀线相互融合，在Ａ蛋白双抗体夹心ＥＬＢＡ测定中，也无明显差异。根据在四种豆科植物上的症状反应，五个分离物可归为两个型：Ⅰ型在豌豆、蚕豆、菜豆和豇豆上产生局部枯斑症状；Ⅱ型在这四种植物上产生系统症状。五个分离物中，ＣＭＶＰ＿２含有五个枝酸组分，其它分离物为四个组分，即ＣＭＶＰ＿２可能含有卫星ＲＮＡ．
１９９１年９月至１９９２年８月逐月采样，采用ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ法对温州蜜柑萎缩病毒（ＳＤＶ）在温州蜜柑苗木各部位及对柑桔衰退病毒（ＣＴＶ）在甜橙苗木各部位的分布进行了全年分析。结果表明ＳＤＶ在老叶、老枝皮中全年均检测不到；在根中仅在７、８月份可检出有少显病毒存在；在嫩叶中３、４、５、６、９、１０月均可检出且浓度较高，而７、８月在嫩叶中检测不出，在嫩枝皮中４、５、６、７、１０月均可检出而７月份浓度有较大幅度降低。这说明冷凉温度下的嫩组织适立于ＳＤＶ的繁殖，最佳检测时期为春梢和秋梢的嫩梢期，最佳检测部位为幼嫩的叶和嫩枝皮。对ＣＴＶ在甜橙苗木各部位分布检测结果表明各部位全年均可检测出带毒且含量均较高，总的变幅不大，冬季和夏季含量有所下降，在老叶中变幅稍大些，这说明甜橙苗木各个部位均适宜于采样且全年均可进行分析。
从宁夏患丛根病甜菜的病根中分离到一种球状病毒粒子，直径约为２８ｎｍ。提纯病毒的紫外扫描呈典型的核蛋白曲线，最大吸收为２６０ｎｍ，最小吸收为２４０ｎｍ，Ａ＿（２６０）／Ａ＿（２８０）＝１．３０。寄主范围广，能侵染茄科、豆科、藜科、葫芦科、番杏科等１７种植物。病毒的ＴＤＰ为６５℃，ＤＥＰ为１０￣（－３），体外存活期６－７天。有较强的免疫原性。病毒的抗血清与烟草环斑病毒（ＴＲＳＶ）之间产生明显的沉淀线。经初步鉴定认为该分离物是烟草环斑病毒。
本研究建立和改进了检测番木瓜和西葫芦组织粗汁液里的番木瓜环斑病毒（ＰＲＶ）的ＤＡＣ－ＥＬＩＳＡ法和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法。用不同的ＥＬＩＳＡ方法来检测不同寄主植物粗汁液里的ＰＲＶ，其所用的合适的制备粗汁液的缓冲液是不同的。用ＤＡＣ－ＥＬＩＳＡ法检测西葫芦粗汁液时，以０．５ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（ｐＨ７．５，内含０．１ｍｏｌ／Ｌ乙二胺四乙酸二钠）为宜；而检测番木瓜粗汁液时，则还要加入０．２５ｍｏｌ／Ｌ脲。用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测时，在上述磷酸盐缓冲液中加入２％聚乙烯吡咯烷铜能提高对西葫芦粗汁液的检测效果。应用合适的制备粗汁液的缓冲液，ＤＡＣ－ＥＬＩＳＡ法和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法的灵敏度分别提高到１／４０９６和１／１０２４（稀释度）。本研究还表明，影响ＤＡＣ－ＥＬＩＳＡ法的定过测定的主要因素是粗汁液的稀释度和包被液（０．０５ｍｏｌ／Ｌ碳酸盐缓冲液，ｐＨ９．６）的用过。在较高粗汁液稀释度和包被液的用量相同时，粗汁液里的病毒含量与ＤＡＣ－ＥＬＩＳＡ法的ＯＤ４９２ｎｍ值呈真实的线性关系。
通过对犬传染性肝炎病毒（ＩＣＨＶ）在犬肾传代细胞内形态发生及其抗原定位的电镜和免疫胶体金电镜研究，发现ＩＣＨＶ除了在宿主细胞核内发生外，还有一条细胞质内的发生途径。在细胞质内病毒核壳体的装配是以均质致密包涵体和副晶格包涵体为“基地”，这与人们熟知的细胞核内形态发生方式相似。免疫胶体金标记显示，细胞质包涵体中含有大量的ＩＣＨＶ抗原成分，显核壳体在细胞质内装配病毒的结构蛋白来源。此外，在感染的细胞质内还观察到与核内相同的病毒核心样结构。
ＨＢＶ－ＤＮＡ的ＰＣＲ二步法扩增及其快速检测方勤，吴云涛，蔡宜权（中国科学院武汉病毒研究所，武汉４３００７１）关键词ＨＢＶ－ＤＮＡ，二步温控ＰＣＲ，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，生物素寡聚核苷酸杂交乙型肝炎是危害人类健康的主要疾病之一，其病原常用的检测方法多...
从广西南宁市的南瓜上分离到一株可经烟粉虱（Ｂｅｍｉｓｉａｔａｂａｃｉ）传播的南瓜曲病毒，它可侵染南瓜（Ｃｕｃｕｒｂｉｔａｍｏｓｃｈａｔａ）和西葫芦（Ｃ．ｐｅｐｏ）引致叶片卷曲和严重矮化的症状。ＥＬＩＳＡ测定表明，其病叶粗提液与非洲木薯花叶病毒（ＡＣＭＶ－Ｋ）单克隆抗体ＳＣＲ１８呈强阳性反应，与ＳＣＲ１１呈较弱的阳性反应，而与ＳＣＲ２３呈阴性反应；与印度木薯花叶病毒（ＩＣＭＶ）单克隆抗体ＳＣＲ５６和ＳＣＲ６６呈强阳性巨应，与ＳＣＲ６２呈弱阳性反应，但与ＳＣＲ５２呈阴性反应。分子杂交试验进一步证实中国南瓜曲叶病的病原是南瓜曲叶双生病毒。
单纯疱疹病毒(HsV)被认为与宫颈癌有关。目前生殖道HSV感染日渐升高，日益引起人
们的重视。由于药物治疗HSV感染有效，因而迫切需要一种简便、快速、有效的检测方法。以
此为目的，我们用细胞裂解法结合FCR技术，检测了102份临床宫颈拭子中HSV—DNA，并与
病毒分离、McAb-ELISA夹心法进行了比较，获得了满意结果，现报告如下。
Duck hepatitis B virus re plicativc complexe~ (DHBV RCs)wcl~e isol~ted from DI-~V—infected duck liver by chromato~aphy thxou Bio--Oel A 5m followed crose gradient centrifugation．The feIathe endogenous DNA polymcra．se activity of the purified RCs was 100 tim es higher than that of the unchromatosraphed one，confirmed by detecting their DHBcAg with Dot-EIA method．
39卷第1期 (2024年2月)
ISSN 1674-0769
EISSN 1995-820X
CN 42-1760/Q
主编: 石正丽
影响因子: 5.5*
*源于2022年JCR
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