1995年10卷1期
病毒病害是农业生产中愈米愈突出的问题。由于病毒对寄主植物细胞的绝对寄生性和植
物没有动物部样完整的免疫代谢系统+使得植物一旦被病毒侵染就终生处在被病毒危害的状
态。这使得植物病毒病的防治较其它植物病害的防治更为围难，也给高选择性的化学抗植物
病毒剂的研究与开发带来了很大的困难。在相当长的一段时问里，抗植物病毒剂的研究一直
设肯大皿实甩价值。随着植物病毒学、病毒分子生物学和抗病毒齐4毒理学研究的深入，也使抗
植物病毒荆的发展步入了一个崭新的发展阶段。一些能防治植物病毒病的保栌剂、治疗荆利
对植物抗性肯醺导作用的药荆已开始实际应用。本文将从(1)目前植物病毒病防治的几种对
策；(2)如何提高防治效果；(3)抗植物病毒荆研究策略等三个方面对抗植物病毒荆的进展进
行一些评价和探讨。由于在植物病毒中RNA类的病毒占了绝大多数(93％)， 且雹害严重的
植物病毒也都是RNA类病毒，因此本文集中讨论RNA型植物病毒的化学防治。
甜菜坏死黄脉病毒(Be~tNecroticYellowVeinVirus，BNYW )是一种由甜菜多粘菌(polf,,~ta
)传播的病毒1987年，囤际病毒分类委员会将萁划分为真菌传杆状病毒组(Furovirus)的
可能成员 。由于甜菜坏死黄脉病毒引起甜菜丛根病，造成甜菜产量和含糖量的严重下降，给
制糖业的发展带来了很大的威胁．所以引起了世界各国的广泛重视。近年来，在甜菜坏死黄脉
病毒分子生物学研究方面取得了很大的进展，本文将对此作一综述。
本文构建了一个能同时表达狂犬病毒糖蛋白（Ｇ）和核蛋白（Ｎ）两种蛋白的重组痘苗病毒。用Ｓｏｕｔｈｅｍｂｉｏｔ和免疫荧光等方法证明Ｇ和Ｎ基因已重组到痘苗病毒ＴＫ基因区，而且能良好地表达。并证明该重组病毒在小鼠中具有良好的免疫效果。
用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，制备了轮状病毒第９基因部分片段的地高辛标记的ｃＤＮＡ探针。ＤＮＡ－ＲＮＡ斑点杂交表明该探针具有轮状病毒Ａ组的特异性，可检出１０ｐｇＨＲＶ－ＲＮＡ。实验中选择了粪便标本提取核酸后点膜和粪便上清直接点膜进行斑点杂交，两种方法的结果一致；同时将斑点杂交法与ＰＡＧＥ法的结果进行了比较。实验结果表明用ＰＣＲ技术直接制备地高辛索标记的ｃＤＮＡ探针具有方便、快速、标记率高、特异性强的特点，具有一定的应用前景。
鼻咽癌中感染的ＥＢＶ以潜伏态存在，只有少数基因得到表达。我们从分子生物学水平研究其潜伏机制。已知ＢＺＬＦｌ基因和ＢａｍＨＩＥＺ片段内部分基因对ＥＢＶ的复制激活起关键作用。我们用体外基因扩增（ＰＣＲ）法扩增ＢＺＬＦｌ基因外显子－１序列，并用序列分析法研究了该基因结构特点。此外，检测了ＢａｍＨＩＥＺ片段内缺失，结果发现２１例鼻咽癌（ＮＰＣ）组织中，ｌｌ例有ＢａｍＨＩＥＺ片段内缺失，长２．９９ｋｂ，与潜伏态存在的ＲａｊｉＥＢＶ类似。提示鼻咽癌小的ＥＢＶ以潜伏态存在，与ＮＰＣ发病有关。
为比较针对中不同基因的ＯＤＮ硫代衍生物阻断乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的抗原表达，合成了与核心蛋白编码基因起始码上游序列（＃１８９３－１９０７），多聚酶蛋白编码基因起始码上游及内部序列（＃２２９７－２３１３，＃２７９７－２８１３）３．５ｋｂＲＮＡ３′端起始负链ＤＮＡ合成序列（＃ｌ８１７－１８３１）互补的寡聚脱氧核苷酸硫代衍生物［Ｃ－ＯＤＮ，Ｐ－ＯＤＮ，ＰＭ－ＯＤＮ，ＰＢＳ－ＯＤＮ］，分别在ＨＢＶ短暂表达和稳定表达细胞培养系统中观察其抑制ＨＢＶ抗原表达的作用。结果发现，当培养液中ＯＤＮ浓度为２０μｍｏｌ／Ｌ时，四种ＯＤＮ均能抑制ＨｅｐＧ２２．２．１５细胞ＨＢｓＡｇ（乙肝表面抗原）的产生（抑制率分别为：Ｃ－ＯＤＮ，２４．５％；ＰＯＤＮ，１３．４％；ＰＭ－ＯＤＮ，３８．４％；ＰＢＳ－ＯＤＮ，２８．４％）；与ＨＢＶＤＮＡ双体质粒共转染ＨｅｐＧ２细胞后部分ＯＤＮ可明显抑制ＨＢＶＤＮＡ在细胞内表达（ＨＢｅａｇ分泌抑制率分别为：Ｃ－ＯＤＮ，５２％；ＰＭ－ＯＤＮ，７０％；Ｐ－ＯＤＮ，４８％；ＰＢＳ－ＯＤＮ，１８％）。用测定上清中人白蛋白的结果证明，Ｃ－ＯＤＮ的细胞毒作用最低。对Ｃ－ＯＤＮ的作用机理及进一步发展ＯＤＮ的应用也进行了讨论。
本文利用离心蚀斑法从武汉地区１９７８－１９８３年及１９８７－１９９２年的７３株呼吸道合胞病毒流行毒株中直接筛选出１７株自然温度敏感株，并以３３°／３９．５°Ｃ的ＩｇＰＦＵ相差≥３作为确定自然温度敏感株的标准。每年筛选出自然温度敏感株的比例平均为１５－ｌ７％；根据毒株温敏性状的差异，将呼吸道合胞病毒流行株分为ｔｓ￣＋，ｔｓ￣±与ｔｓ毒株；并初步发现Ｂ亚型毒株所含的自然温敏株的比例明显高于Ａ型毒株（Ｐ＜０，０５）。初步测定２株该自然温敏株的遗传稳定性，结果显示具有较稳定的特性。本文结果提示，呼吸道合胞病毒在自然界不仅存在Ａ，Ｂ两亚型变异，也存在温敏性状的变异，可能存在毒力的变异。
本文以核酸原位分子杂交法研究了国内不同地区ＨＦＲＳ尸检病例组织中病毒ＲＮＡ的分布和定位。结果在１９例病例组织中均可检测到病毒ＲＮＡ。陕西及沈阳地区病例，阳性部位主要是各脏器上皮及实质细胞。江西地区病例，病毒ＲＮＡ主要出现于各脏器组织内血管壁及毛细血管内皮细胞。广州一例，病毒ＲＮＡ主要分布于肝脏灶性溶解性坏死区域，肺泡壁和肾间质血管等部位。病毒ＲＮＡ主要定位于细胞胞浆，呈颗粒状或全浆阳性，也出现干部分组织少数细胞胞核中。此外，病毒ＲＮＡ还出现于细胞外液和红细胞表面。结果说明，ＨＦＲＳ病毒具有泛嗜性感染及上皮性组织或血管内皮细胞易感的特点，后者可能取决于不同地区ＨＦＲＳ病例所感染的病毒的血清型或毒株不同，从而引起不同类型ＨＦＲＳ及其病理和发病机理的差异。
棉铃虫核型多角体病毒（ＨａＮＰＶ）杀虫剂可湿性粉剂防治第三代棉铃虫，防治效果为８６．２％。使用酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）检测棉铃虫核型多角体病毒在土壤中的滞留，结果表明：施用病毒杀虫剂１、３、５、７天和两个月后都可检测到该病毒的存在。１９９３年９月上旬从河南封丘棉田采集的露水，ｐＨ为７．９８，病毒多角体在露水中保存３天，其生物活性无明显下降。
本文报道利用油桐尺蠖核型多角体病毒感染处于不同培养基及不同培养时间的Ｂｓ４８４细胞的部分感染效果和特征。结果表明，细胞培养基的类型和细胞传代后的时间对病毒感染率和多角体产量以及其它感染特征都有比较明显的影响；经过比较，处于Ｇｒａｃｅ培养基组的传代后三天的Ｂｓ４８４细胞是一个理想的ＢｓＮＰＶ感染受试系统。同时发现，健康的油桐尺蠖血淋巴具有提高细胞活性及病毒感染效果的作用。
木毒蛾质型多角体病毒呈不规则多面体，大小差异较大，大多数在０．８～２．１μｍ之间；病毒粒子在多角体内随机分布，病毒粒子为正二十面体结构，有１２个顶体，每个顶体上均有一个球状结构，平均直径约为６０ｎｍ。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，多角体蛋白由一条分子量为３ｌｋＤ的主带及３条次带组成；病毒粒子结构蛋白由６条多肽组成，分子量在１２．６～３３ｋＤ之间。多用体蛋白富含天冬氨酸，谷氨酸及酪氨酸，而半胱氨酸和甲巯氨酸含量较少，其碱性氨基酸与酸性氨基酸之比为１．４３。病毒核酸对ＲＮａｓｃ和ＤＮａｓｅ的稳定性试验及对甲醛的稳定性试验和吖啶橙染色试验，证明孩核酸为双链ＲＮＡ，其解链温度为８７℃，由１０个基因片段组成，分子量在２．４６×１０６～０．３５×１０６道尔顿之间，总分子量为１４．４２×１０６道尔顿，电镜分析研究显示该核酸长度在０．５μｍ、１．０μｍ和１．３μｍ处各有一个分布峰。
利用克隆的马铃薯卷叶病毒（ＰＬＲＶ）外壳蛋白（ＣＰ）基因测ｃＤＮＡ，用切口平移法制成￣（３２）Ｐ标记探针，通过核酸斑点杂交，对马铃薯卷叶病毒ＲＮＡ，提纯的马铃薯卷叶病毒和感染ＰＬＲＶ的马铃薯茎、叶、块茎及带毒桃蚜进行了检测。结果表明：ＰＬＲＶ－ＣＰ基因的ｃＤＮＡ探针特异性强，灵敏度高。可测出提纯的ＰＬＲＶ－ＲＮＡ的最低量为４０ｐｇ，感病马铃薯植株茎叶提取液的最高稀度为１：７５。探针只与ＰＬＲＶ及其ＲＮＡ反应，而不与ＰＶＹ、ＰＶＳ等病毒及其ＲＮＡ反应。从而为马铃薯卷叶病毒的有效诊断，建立了一项比血清学更为可靠、灵敏、特异性强，同时又适于大量样品检测的分子生物学方法。
１９９３年４月从杭州蚕豆田病株上分离获得病毒分离物Ｂ－９３５Ａ，汁液摩擦接种５科１９种植物，Ｂ－９３５Ａ能侵染３科１２种植物。被侵染的蚕豆产生黄斑、花叶，后期叶片黄化并有坏死；在菜豆上产生局部枯斑。Ｂ－９３５Ａ的钝化温度为８５－９０℃，稀释限点为１０￣（－５）－１０￣（－７）病毒粒体杆状，平均长度约３００ｎｍ，病毒的衣壳蛋白亚基只有一条多肽链，分子量约为１７．５ｋＤ，包裹的核酸为申链ＲＮＡ，长约６．４ｋｂ．琼脂双扩散试验和免疫电镜试验表明，Ｂ－９２５Ａ与烟草花叶病毒（ＴＭＶ）有十分密切的血清学关系。根据以上试验结果，Ｂ－９３５Ａ被鉴定为烟草花叶病毒的蚕豆株系。这是国内外首次报道从蚕豆上分离到ＴＭＶ，也是我国首次从豆科作物上分离到的一个ＴＭＶ株系。
试验中用电镜观察了牛病毒性腹泻病毒ＯｒｅｇｏｎＣ２４Ｖ株在感染新生牛睾丸细胞中的形态发生，成熟的病毒颗粒是直径约为５０ｎｍ的球形颗粒，内含直径约为３０ｎｍ的核心。病毒在宿主细胞的胞质内复制，通过糙面内质网膜出芽成熟。病毒可以通过外排或在细胞死亡后含有病毒颗粒的空泡崩溃而释放到胞外。
不同世代及中肠病变类型的松毛虫单头幼虫多角体含量许再福（浙江农业大学植保系，杭州３１００２９）戴冠群（华南农业大学植保系，广州５１０６４２）关键词马尾松毛虫，质型多角体病毒，多角体含量，世代，病变中肠源于日本赤松毛虫质型多角体病毒（Ｄｅｎｄｒｏｌｉｍ...
小盾纤恙螨被认为是流行性出血热(EHF)的传播媒介。为查明其媒介意义。】989年和1990年．我们曾先后甩。鼠体恙螨分离法(I法) 和“自然界游离螨叮刺黑线姬鼠法(I法)”D 进行本课题的研究，取得了初步的结果。]991年．又用两种新方法(Ⅲ法和N法)进行研究，取得了进一步的结果，作出了明确的结论。
39卷第1期 (2024年2月)
ISSN 1674-0769
EISSN 1995-820X
CN 42-1760/Q
主编: 石正丽
影响因子: 5.5*
*源于2022年JCR
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