1995年10卷2期
选用中草药人参、黄芪、麦冬及微量元素铬于体外培养的人及鼠心肌细胞上，研究药物对细胞生长代谢及其抗病毒作用。实验表明：中草药及铬均有促进细胞生长代谢、延长细胞存活时间、增强鼠心肌细胞自发收缩搏动及提高人心肌细胞抗病毒的作用，其中麦冬、黄芪及铬的作用更明显。
应用ＳＤＳ－聚内烯酰胺凝胶电泳及免疫转印技术对流行性出血热患者血清中免疫复合物组分进行了分析。流行性出血热循环免疫复合物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分离，考马斯亮兰染色，显色主要有７条带，分子量分别为２３ｋＤ、５０ｋＤ、５２ｋＤ、６５ｋＤ、７２ｋＤ、８０ｋＤ及１００ｋＤ。采用该病毒特异性抗血清、单克隆抗体以及人免疫球蛋白、补体成分抗血清识别，在其循环免疫复合物中可检出特异性病毒抗原及相应的免疫球状蛋白和补体成分。应用ＰＣＲ技术在部分患者循环免疫复合物中可检出病毒核酸。上述结果从分子水平证实流行性出血热患者的ＣＩＣ中存在病毒抗原与特异性抗体是其循环免疫复合物的主要组分，它们构成了不同类型的免疫复合物，并且大多数可以结合补体成分。
用戊肝病毒（ＨＥＶ）基因组编码氨基酸序列１－９０１－９１４／2-５１５－５３０、３－９１－１２３、２－６１３－６５４相应的三段合成多肽为抗原，研制出一种检测抗－ＨＥＶＩｇＧ的ＥＬＩＳＡ试剂。以该试剂检测中国、缅甸、印度和前苏联肠道传播非甲非乙型肝炎（ＥＴ－ＮＡＮＢＨ）病人血清１０５份，仅３份中国病人血清阴性，阳性率为９７．１％；检查实验感染ＨＥＶ黑猩猩血清，感染前阴性，感染后阳性；检查正常人血清９９份，全部阴性；检查甲肝（ＨＡ）、乙肝（ＨＢ）和丙肝（ＨC）病人血清４６份，仅１份丙肝血清阳性（中和试验证明为抗－ＨＥＶ真阳性）。和美国重组抗原抗－ＨＥＶＥＬＩＳＡ试剂比较，敏感性和特异性无显著差异，符合率为８１．２％。用已知阳性血清８份，阴性血清２份作精确性试验，除１份阴性血清因ＯＤ值很低致变异系数偏高（３３．５％）外，余变异系数均不超过１０％。用已知阳性血清２０份，阴性血清１０份重复检测３次，平均ＯＤ值无显著性差异。上述结果表明，该抗－ＨＥVＥＬＩＳＡ试剂具有很高的敏感性、特异性，检测结果稳定。
对广东省一名慢性丙型肝炎病人血清中的ＨＣＶ基因组ＮＳ１区进行分子克隆及序列测定。采用微粒吸附法提取ＨＣＶＲＮＡ，随机引物逆转录后进行聚合酶链反应。所用引物位于ＮＳ１区，扩增产物７８０ｂｐ在低熔点琼脂糖中电泳，回收相应条带处凝胶，与ｐＵＣ１８的连接反应直接在低熔点琼脂糖中完成。重组体转化ＪＭ１０９，挑取菌落增殖后提取的质粒采用ＰＣＲ和酶切法鉴定阳性克隆。将其中３２０ｂｐ的片段亚克隆ｐＵＣ１８和ｐＵＣ１９，随后采用双脱氧链末端终止法测其核苷酸序列，与国内外多个株比较，同源性介乎６８．８６％—９０．８４％。
用透射电子显微镜观察术，对狂犬病固定毒“北京株”在地鼠肾传代细胞（８ＨＫ＿（２１））中增殖的形态学变化进行了研究。在受感染的细胞中有大量子弹状和长杆状的病毒颗粒。大多数病毒在扩张的内质网膜上以出芽的方式发生，凸向内质网腔内并逐渐发育成子弹状和杆状的成熟病毒。含病毒的内质网周围常伴有颗粒状或丝状均质区域，少数病毒在细胞膜上芽生。细胞间隙中亦可见病毒。还见病毒在细胞核膜内、外层上芽生，核周间隙中有许多病毒，有的与核边缘染色质密切接触并使其缺损。细胞核有的肿胀，有的浓缩，有的核内有较多的染色质间颗粒和周颗粒，但均未见病毒颗粒。表明该病毒的发生发育对细胞的膜性系统有密切依赖性，同时该病毒对宿主细胞有破坏作用。
根据已发表的乙型脑炎病毒核苷酸序列，设计合成了１９寡核苷酸，作为检测该病毒的基因探针。以大肠杆菌ＤＮＡ聚合酶ＩＫｌｅｎｏｗ片段标记合成的寡核苷酸后，经过分子杂交证明该探针能检测出１ｐｇ靶ＤＮＡ或ＪＥＶ感染Ｃ６／３６细胞６小时后的病毒。
应用抗ＨＣＶＣ＿（３３ｃ）抗原２Ｂ６株单克隆抗体和抗ＨＢｘＡｇ多克隆抗体。以ＡＢＣ法对８６例肝硬变组织进行ＨＣＶ及ＨＢＶ相关抗原定位研究，ＨＣＶＣ＿（３３ｃ）抗原及ＨＢｘＡｇ在肝硬变中的阳性率分别为７６．７％及６２．８％，Ｃ＿（３３ｃ）抗原和ＨＢｘＡｇ阳性占所检病例８８．４％，二者同时阳性为５１．２％，ＨＣＶＣ＿（３３ｃ）抗原位于肝硬变组织的肝细胞胞桨内，充满整个胞桨，细胞核及胞膜未见阳性；阳性细胞呈弥漫、局灶及散在分布三种形式，以弥漫、局灶分布为主。部分病例阳性细胞周围有较多的淋巴细胞、单核细胞浸润。并发现ＨＣＶＣ＿（３３ｃ）抗原位于小胆管上皮细胞内。结果提示ＨＣＶ感染致肝细胞损伤可能是免疫反应参与的免疫损害。除ＨＢＶ以外，ＨＣＶ感染在我国肝硬变发生中起一定作用，在肝硬变组织中ＨＣＶ、ＨＢＶ重叠感染较为普遍。
本文采用抗原捕捉ＥＬＩＳＡ方法检测了ＨＣＶ感染者血清中抗－ＨＣＶＩｇＧ抗体轻链κ和λ的比值，发现所检测的抗ＨＣＶ－ＮＳ４、抗ＨＣＶ－ＣＰ１和抗ＨＣＶ－ＣＰ２抗体轻链的表达呈现明显的偏斜，６５例抗ＨＣＶ阳性者中６３例（占９６．９％），至少一种抗ＨＣＶ抗体κ／λ偏离了正常１：１的比值，尤以λ链较多，分别占６５．６％、８９．９％和７０．２％，但任何一个ＨＣＶ感染者血清抗－ＨＣＶ抗体既可能是κ链占优势，也可能是λ链为主；对６例抗ＨＣＶ阳性者追踪观察了一年，发现抗ＨＣＶ抗体κ／λ比值稳定不变。提示感染ＨＣＶ后，病毒抗原可能稳定地刺激单个或少数Ｂ细胞优势克隆产生抗－ＨＣＶ抗体现为ＨＣＶ感染者抗－ＨＣＶ抗体产生的不均匀性和Ｂ细胞优势克隆的存在，这一结果将有助于深入研究宿主抗ＨＣＶ应答的规律，为抗ＨＣＶ保护性免疫与ＨＣ疫苗研究提供线索。
木毒蛾核型多角体病毒属昆虫杆状病毒科，核型多角体病毒属，多粒包埋型。在扫描电镜下，多角体呈不规则多面体，大小下一，平均直径为１．４μｍ，病毒粒子杆状，大小约为３９４×５６ｎｍ，经ＳＤＭ－ＰＡＧＥ分析，病毒多角体蛋白分子量为３０．５ｋＤ，病毒粒子结构蛋白由１９条多肽组成，分子量范围在８８－１７ｋＤ之间。多角体富含Ｇｌｕ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、而Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、和Ｈｉｓ含量较少。其酸碱氨基酸之比为１．２６。病毒核酸为一环状ＤＮＡ，长度约为３８μｍ，经ＨｉｎｄⅢ、ＰｓｔⅠ、ＥｃｏＲⅠ和ＢｇｌⅠ单酶切以及ＢａｍＨⅠ＋ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨⅠ＋ＰｓｔⅠ、ＢａｍＨⅠ＋ＢｇＩⅠ和Ｘｈｏｌ＋ＥｃｏＲⅠ双酶切分析，ＤＮＡ总分子量约为７１．６×１０￣６Ｄａｌｔｏｎｓ。
本文报道了在番木瓜环斑病毒（ＰＲＶ）弱株系保护作用中，保护接种与攻击接种的浓度，以及攻击接种的部位等因素对ＨＡ＿（５－１）弱株系保护作用效果的影响结果。通过分析弱株系和强株系在保护接种后攻毒的植株体内的病毒浓度，表明ＨＡ＿（５－１）弱株系对Ｓｍ株系的保护作用的崩溃是由于强株系在植株顶端叶片中的病毒浓度越来越高所致。本义还就ＰＲＶ弱株系在田间的应用技术作了一些讨论。
以牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）ＩｎＬ株的基因组ＲＮＡ为模板，经逆向转录酶作用，合成第一链ｃＤＮＡ，再以ＲＮａｓｅ／Ｈ与ＤＮＡ聚合酶Ｉ联合作用合成ｄｓｃＤＮＡ，并以ｄＣ同聚物尾化。ｐＵＣ８ＤＮＡ在ＰｓｔＩ酶解后，以ｄＧ同聚物尾化，两者退火构成重组质粒，转化到Ｅ．ｏｏｌｉＪＭ１０１受体菌中。另以γ－￣（３２）Ｐ－ＡＴＰ标记ＢＶＤＶＲＮＡ制备探针，通过菌落原位杂交筛选重组子。酶切分析表明重组质粒插入片段最长接近１２ｋｂ。该片段含有ＥｃｏＲⅠ，ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨⅠ的酶切位点，此ｃＤＮＡ文库基本上包括了ＢＶＤＶ基因组。
采用中和试验比较了草鱼出血病病毒ＧＣＨＶ８７３的１１个多肽的免疫原性，确定了主要中和抗原。纯化的单个病毒多肽免疫家兔获得抗血清，多肽ＶＰ＿１、ＶＰ＿５、ＶＰ＿６和ＶＰ＿９的抗血清具有中和效价，而ＶＰ＿２、ＶＰ＿３、ＶＰ＿４、ＶＰ＿７、ＶＰ＿８、ＶＰ＿（１０）和ＶＰ＿（１１）则不能诱生中和抗体。其中ＶＰ＿６的抗血清中和效价最高，因此，ＶＰ＿６极可能是病毒多肽中的主要中和抗原。
黄芪Ａ＿６组分与无环鸟苷联合对Ⅰ型单纯疱疹病毒感染小鼠的治疗作用左丽，董熙昌，孙晓娟（贵阳医学院微牛物学教研室，贵阳５５０００４）关键词黄芪，无环鸟苷，药物协同作用，Ⅰ型中纯疱疹病毒，小鼠单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）是人类最常见的病原之一，可引起多种疱疹性...
用液相免疫沉淀法从感染兔出血症病毒（ＲａｂｂｌｔＨａｅｍｏｒｒｈａｇｉｃＤｉｓｅａｓｅＶｉｒｕｓ，ＲＨＤＶ）８小时后的兔肝组织的多聚核糖体中，分离出ＲＨＤＶ特异性的多聚核糖体，并由此获得全核酸，经Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）－ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ亲和层析，得到３．４Ａ＿（２６０）的ＲＨＤＶｐｏｌｙ（Ａ）￣＋ＲＮＡ占全核酸的３．５％。此Ｐｏｌｙ（Ａ）￣＋ＲＮＡ经甲醛变性琼脂糖电泳，得到６条单一的带，其大小分别为０．９５、１．２２、１．８２、２．４０、３．６３和５．０１ｋｂ。在兔网织红细胞体外翻译体系中，此Ｐｏｌｙ（Ａ）￣＋ＲＮＡ能促进￣３Ｈ－亮氨酸的掺入，其掺入量为对照组的６．３倍。翻译产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和免疫转印可得到６条带，分子量分别为６４．５６、５８．８８、５３．７０、５１．４０、２８．４４和２３．９８ｋＤ。
兔出血症病毒主要结构多肽的氨基酸分析王恒安，杜念兴，徐为燕（南京农业大学，南京２１００９５）关键词兔出血症病毒，结构多肽，氨基酸分析有关兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）结构多肽的报道很多，有认为只有１条，有报道４条的，也有报道多达６条的。但其主要结构多肽为分...
39卷第1期 (2024年2月)
ISSN 1674-0769
EISSN 1995-820X
CN 42-1760/Q
主编: 石正丽
影响因子: 5.5*
*源于2022年JCR
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