1995年10卷3期
利用呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）的单克隆抗体（ＭｃＡｂ），通过间接免疫荧光法和免疫转印法对本室分离到的武汉地区１９８８一１９９２年的５６份ＲＳＶ毒株进行了分型，可将其分为Ａ、Ｂ两型和Ｂ１、Ｂ２亚型。流行病学分析显示：本地区ＲＳＶ的主要流行株，四年中有三年为Ｂ型株，不同于欧美等地；Ａ、Ｂ两型的分布还具有局灶化分布的特点；两型在性别、发病年龄之间无显著性差异。
用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，对内蒙古自治区三个不同地理位置的少数民族自治旗及一个城市汉族对照区秋冬季采集的新生儿胎便及婴幼儿急性腹泻便进行轮状病毒ＲＮＡ基因组特点分析。共检测胎便标本１４６份，腹泻便标中１１６份。结果表明：几个少数民族地区流行的轮状病毒均以Ａ组第Ⅱ业组为士，并在一个地区有多种差异电泳型存在。新生儿胎便中可检出轮状病毒并显示了特征性Ａ组轮状病毒ＲＮＡ基因型。胎便小轮状病毒检出率高的地区，腹泻便检出率也相应高，轮状病毒的检出率与民族、地理位置尤明显关系，而与当地的卫生条件及地形有关。阳性标本使用Ａ组单克隆抗体酶标免疫试剂进一步证实。
应用免疫组化、原位分子杂交、电镜及免疫电镜等方法进一步对肾综合征出血热人体尸检组织中病毒包涵体（ＩＢ）的抗原、核酸性质和超微结构特点作了进一步观察。结果，在３９例中的２０例尸检病例组织中显示出病毒核蛋白抗原和血凝素抗抗原阳性的ＩＢ，其中包括１６例陕西尸检病例组织中的６例休克期和１例多尿期病例，１７例上海病例中的３例休克期和９例少尿期病例及３例江西病例中的１例休克期病例。ＩＢ主要分布在呼吸道和肺泡、肾远曲小管和集合管、胃肠道、腺垂体、扁桃体、胰腺、前列腺等组织的粘膜上皮和腺上皮细胞及肝细胞和睾丸生精上皮细胞胞浆中，阳性细胞形态基本正常。应用原位分子杂交，可在该组细胞小同时检测到病毒ＲＮＡ，多为胞浆内弥漫阳性，仅少数组织中显示出病毒ＲＮＡ阳性ＩＢ结构。电镜观察阳性组织细胞中出现由大量微丝微管及颗粒样结构组成的ＩＢ结构，其小的病毒颗粒状结构、内质网及纤维丝状结构呈病毒抗原阳性，上述结构位于高尔基体区。结果说明该病毒有感染上皮细胞的特性，对其宿主细胞的致细胞病变作用是极其温和的，且多表现在亚细胞水平。ＩＢ可能是病毒过量表达抗原的堆积或病毒复制部位，而微丝微管结构可能参与病毒的感染过程。
对１９８９年春在河北保定分离的两株乙型流感病毒进行了抗原性、ＨＡ＿１基因序列和种系发生分析，与不同期的国内外代表株比较结果表明，自１９８８年以来乙型流感病毒变异较快，Ｂ／河北／５３／８９株的ＨＡ＿１基因序列与Ｂ／挪威／１／８５株相比，其氨基酸的同源性为９４．５２％，与同期的Ｂ／香港／２０／８９株同源性为９７．１２％。种系发生分析结果，从１９８８至１９８９年乙型流感病毒出现了５个支系，同期在保定分离的两株病毒，在同源替代中分别属于两个支系。日本国基本每隔两年出现一次乙型流感的流行优势型，其发生频度与甲型流感相似。国内少见乙型的流行优势型，可能和使用的分离病毒材料有关，日本用ＭＤＣＫ细胞比国内用鸡胚对乙型流感病毒的分离阳性率高。
用ＨＳＶ－１接种人单核细胞传代株Ｕ＿（９３７）和Ｔ淋巴细胞传代株ＨＳＢ＿２细胞，通过对病毒滴度、细胞增殖与病变、病毒抗原表达及病毒ＤＮＡ的动态观察，研究了ＨＳＶ－１感染两种细胞的特点。结果发现接种病毒后，Ｕ（９３７）细胞仅允许病毒短时间低滴度复制，培养上清中病毒滴度在１２天内降至测不出水平，细胞经过１～２周后增殖受抑、死亡增多，然后又逐渐恢复；用ＬＰＳ持续刺激则能提高病毒感染滴度，延长感染时间，形成短期持续感染。ＨＳＢ＿２细胞允许病毒复制至较高滴度，呈现急性杀细胞性感染；用ＰＨＡ持续刺激也不改变细胞感染的特点。
以柯萨奇Ｂ＿３病毒（ＣＶＢ＿３）感染Ｂａｌｂ／ｃ小鼠建立心肌炎模型，检测了小鼠脾脏中Ｔ细胞亚群和血清中的抗心肌抗体，并进行了心脏病毒分离及组织病理学检查。结果显示，病毒感染后５天，脾脏中Ｔｈｙ１，２￣＋（Ｔ＿总）增高，７一１５天降低，第２１天恢复正常。Ｌ３Ｔ４￣＋（Ｔｃ／Ｔｓ）于病毒感染后５一２１天均明显高于对照组。Ｌ３Ｔ４＋（Ｔｈ／ｉ）于病毒感染后７天开始增高，直到２１天均明显高于对照组。病毒感染后１５天，抗心脏肌球蛋白抗休开始增高，第２１天继续增高。病毒感染后３一５天，心脏病毒分离均为阳性；第７天部分小鼠心脏中仍可分离出病毒；第１５天心脏病毒分离为阴性。病毒感染后７一２１天，心肌坏死、间质炎细胞浸润等病理变化进行性加重。上述结果提示，病毒感染本身和免疫因素都可能参与心肌炎的发病。
应用常规病理、免疫病理及超微病理技术，对３３例流行性出血热（ＥＨＦ）患者皮肤活检标本的病理变化及病毒抗原、免疫复合物进行观察，同时与血清病毒抗原、抗体及循环免疫复合物检出情况进行比较。在２３例ＥＨＦ患者皮肤微血管内皮细胞中检出病毒抗原，部分组织中可同时检出免疫球蛋白及Ｃ３，少数组织仅能检出病毒抗原或免疫球蛋白。配对血清小也可检出ＥＨＦ病毒抗原、抗体及循环免疫复合物。组织及血清免疫复合物形成与血清补体Ｃ３水平下降有关，组织内肥大细胞脱颗粒与血清ＩｇＥ水平升高相关，提示多种变态反应参与了流行性出血热的发病机制。
人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）含有２个晚期开放读码框（ＯＲＦ），Ｌ＿２ＯＲＦ编码的蛋白具有型特异性。本研究用能表达产生完整ＨＰＶ６ｂＬ＿２蛋白的质粒ｐ６ｂＬ＿２ＮＸ，采取核酸外切酶Ⅲ定向连续次级克隆的方法，制备了一系列一端逐渐删切的ＤＮＡ片段，诱生一组从Ｃ端至Ｎ瑞依次减少的Ｌ＿２蛋白与相应血清作免疫印迹实验，最小的仍保持阳性反应的多肽即含有抗原表位，实验结果ＨＰＶ６ｂＬ＿２蛋白的核酸编码区位于５４８１－５５０６之间，其相应氨基酸序列是ＥＰＧＩＮＰＴＱ。
本文报道了９７例疟疾患者丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染的原因。发现疟疾患者抗－ＨＣＶ阳性率为７１．１３％，其中有单采血浆还输血细胞（下称单采浆）献血史者为８９．７１％，有受血史者为６４．２９％，既无单采浆史又无受血史者无一例抗－ＨＣＶ阳性。有单采浆史的疟疾患者与同村非疟疾的单采浆献血者相比，抗－ＨＣＶ阳性率无显著不同，且二者均显著高于同村既无单采浆史又无受血史的非疟疾人群。在无单采浆史和受血史人群中，疟疾病例和非病例抗－ＨＣＶ阳性率很低。说明有单采浆史的疟疾病例ＨＣＶ感染与单采浆有关，有受血史的疟疾病例ＨＣＶ感染与受血有关。对当地单采浆血站进行调查，发现在采血、分离血浆和血细胞还输过程中存在血液交叉污染，这是导致有单采浆史的疟疾病例ＨＣＶ感染的主要原因。
采用固相法合成ＨＩＶ－１和ＨＩＶ－２两个多肽，建立了用混合多肽为包被抗原检测ＨＩＶ－１和ＨＩＶ－２感染的间接酶联免疫吸附法。检测４６份抗ＨＩＶ－１和ＨＩＶ－２抗体阳性血清标本以及９４份对照血清标本，与ＵＢＩ试剂比较，其阳性符合率为９７．８％，阴性符合率为１００％，总符合率为９９．３％。实验结果表明，此法可用于ＨＩＶ－１和ＨＩＶ－２感染的检测。
成功研制出棉铃虫病毒（ＮＰＶ）杀虫乳悬剂，改进了生产工艺和设备，建立了棉铃虫的室内品系，提高了生产效率，建立了产品的检测方法，提高了产品质量，促使棉铃虫病毒杀虫剂商品开发获得成功。大田试验证明，病毒乳悬剂的防治效果，相当于当前推广的化学农药，优于原病毒可湿性粉剂。相同剂量（０．５３一１．０７×１０（１０）ＰＩＢ／公顷）的病毒乳悬剂可使虫口平均减退９１．７％，而病毒可湿性粉剂为８３．７％。
田间采集辽宁地区烟叶脉坏死病标样所得分离物，在测定的１２个科３５种植物中只侵染茄科的一些烟草品种及洋酸浆（ｐｈｙｓａｌｉｓｆｌｏｒｉｄａｎａ），可由桃蚜（Ｍｙｚｕｓｐｅｒｓｉｃａｅ）传播。病叶汁液稀释限点（ＤＥＰ）为１０￣（－２）－v１０￣（－３）；失毒温度（ＴＩＰ）为５５一６０℃；体外保毒期（Ｌ）为４８－７２小时。病毒粒体形态呈线条状７２０×１２ｎｍ，病叶脉坏死部细胞质中含风轮状内含体。病毒提取物的紫外最大吸收为２６５ｎｍ，最小吸收为２４５ｎｍ，Ａ＿（２８０）／Ａ＿（２６０）为０．８２。该病毒分离物与ＰＶＹ￣０抗血清呈阳性反应。以病毒ＲＮＡ为模板，按国外报道的ＰＶＹ￣Ｎ序列合成引物经逆转录合成ｃＤＮＡ。用ＰＣＲ扩增出约０．８０ｋｂ的ＣＰ基因片段，将这一片段插入载体ｐＧＥＭ７Ｚ－ｆ（＋）中转化Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５ａ菌株得到了ＣＰ基因的克隆。ｃＤＮＡ序列分析表明，和国外报道的ＰＶＹ￣Ｎ序列同源性极高，初步表明引起辽宁地区烟叶脉坏死病的毒原为ＰＶＹ￣Ｎ。
建立了香蕉试管苗黄瓜花叶病毒ＤＡＣ－ＥＬＩＳＡ检测技术。应用０．１ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（ｐＨ７．２，内含１％ＮａＤＩＥＣＡ）作为样品制备缓冲液，检测灵敏度可达到１／５１２０（稀释度）。两年来检测了１２８７个样品，香蕉试管苗生产繁殖材料的带毒率为２．８％。
粗提病毒经Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ层析后，获得纯化的兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）。提纯病毒经过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ经考马斯亮蓝染色显示Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ和Ｇ７条多肽，凝胶扫描显示Ａ为ＲＨＤＶ主要结构多肽。用多抗和单抗作免疫转印分析，证实Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、和Ｇ为结构多肽，此６条结构多肽间的抗原关系十分密切。
兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）在ｐＨ８．６的琼脂糖凝胶上电泳，在负极侧有一血凝峰，免疫电镜观察有大硅ＲＨＤＶ颗粒，证实ＲＨＤＶ病毒粒子带正电荷。利用这一特性可用对流电泳提纯病毒。将抗体与病毒颗粒形成的沉淀带切下，作ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，经免疫转印出现６条区带，其中６０ｋＤ的ＶＰ_１为主要结构多肽。用免疫复合物提取核酸，以狄高辛标记制成探针，能与病毒核酸和克隆的ＲＨＤＶｃＤＮＡ２．２ｋｂ片段和４．８ｋｂ片段杂交，探针灵敏度达ｐｇ水平。能用病毒核酸作模板制备探针，证实ＲＨＤＶ的核酸为ＤＮＡ。
从新疆分离的黄地老虎颗粒体病毒（ＡｓＧＶ）和惊纹鸣夜蛾颗粒体病毒（ＡｅＧＶ）除感染各自的分离寄主外，均能感染对方的分离寄主。用琼脂糖双扩散、对流免疫电泳，斑点－酶联免疫吸附和线免疫电泳等免疫学技术检测ＡｓＧＶ和ＡｅＧＶ的免疫学亲缘关系，结果表明二者间存在非常密切的亲缘关系。并对线免疫电泳技术的效用进行了讨论。
马铃薯Ｙ病毒组两病毒辅助成分的纯化及其传毒专化性的研究吴云峰（植物病虫害生物学国家重点实验室，中国农业科学院植保所，北京１０００９４）魏宁生（西北农业大学植物保护系，陕西杨陵７１２１００）关键词马铃薯Ｙ病毒组，辅助成分，蚜虫传毒专化性自从１９７１年Ｋ...
39卷第1期 (2024年2月)
ISSN 1674-0769
EISSN 1995-820X
CN 42-1760/Q
主编: 石正丽
影响因子: 5.5*
*源于2022年JCR
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