1996年11卷4期
鸡传染性贫血病是由鸡传染性贫血病毒因子（Chicken anae~aia agent，CAa)引起的再生障碍性贫血和全身淋巴组织萎缩性免疫缺陷病。自Yuasa等? 首次报道并分离了该病毒后，世界许多国家包括中国l2-3 都相继证明了该病的发生。鉴于此病的垂直和水平传播引起的临床和亚临床感染所造成的较大经济损失，故该病目前已被纳入世界范围内重要禽病研究的行列。
蚜传病毒是一类重要的植物病毒．广泛为害农业作物及经济作物，并造成严重减产和巨大
的经济损失，加之介体蚜虫种类多、易爆发等原因，使防治工作较为困难。因此，蚜虫传毒机制
历来被认为是防治蚜传病毒病的突破口。1928年DooGttle和walkerl 用桃蚜(Myzus
m )首次成功传播了黄瓜花叶病毒(CMV)，并提出了口针传毒假说(Stylet—borne hypothe—
sis)”j。进入90年代后，随着膜生物学、生物化学和标记技术的成熟．蚜虫传毒机制研究取得
较大进展。本文就蚜虫传毒的分子基础．从病毒、蚜虫介体和寄主植物三个方面作一综述。
人乳头瘤病毒(HPv)是一类嗜上皮性的双股DNA肿瘤病毒．它可引起人类皮肤、粘膜的
多种增生性疾病。近年来，HPv相关性疾病发病率逐渐升高，严重危害人们的健康。高危型
HPV与多种恶性肿瘤密切相关，在宫颈癌、喉癌、膀胱癌、皮肤癌、消化道癌、肉瘤、骨髓瘤、宫
颈癌患者淋巴结中都有很高的HPV相关序列测出。HPV致癌机制。基因转录拼接及调控机
理、检测手段、治疗方法成为日益迫切的研究问题，并引起了国内外学者高度重视。近年来，人
乳头瘤病毒的研究已取得了多方面的成果。
用套式多聚酶链反应（Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）技术对１６９对ＨＢｓＡｇ及ＨＢｓＡｇ／ＨＢｅＡｇ阳性孕妇及其新生儿外周血清进行了ＨＢＶ－ＤＮＡ检测。１０３对ＨＢｓＡｇ阳性孕妇及其新生儿外周血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为７２．８％和３３．０％；６６对ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ双阳性的孕妇及其新生儿外周血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为８６．４％和４３．９％。对５５例ＨＢｓＡｇ及ＨＢｓＡｇ／ＨＢｅＡｇ阳性产妇产后的初乳进行了ＨＢＶ－ＤＮＡ检测，结果ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率为３６．４％。结果表明ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ双阳性的孕妇及其新生儿外周血清ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率较ＨＢｓＡｇ单阳性的孕妇及其新生儿要高，其初乳中ＨＢＶ－ＤＮＡ的检出率也高。还对１０５例注射了乙肝疫苗及高价乙肝特异性免疫球蛋白的６月龄婴儿的外周血清进行了ＨＢＶ－ＤＮＡ检测，结果有２３例阳性。
为了探讨从核苷酸水平耐汉坦病毒进行分型，设计两对型特异性引物，采用反转录和聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ），对亚太地区１８株汉坦病毒进行了扩增鉴定，并对其中７株汉坦病毒的ＰＣＲ产物进行了测序分析。ＰＣＲ的分型结果表明，Ⅰ型引物只能扩增血清Ⅰ型病毒的ｃＤＮＡ；Ⅱ型引物也只能扩增血清Ⅱ型病毒，其间无交叉反应。采用巢式ＰＣＲ和限制性内切酶验证了ＰＣＲ产物的特异性。序列分析结果表明，Ｒ３６Ｍ片段Ｇ１区的核苷酸序列与血清Ⅰ型病毒代表株７６－１１８的同源性为７８．４％，而与血清Ⅱ型病毒Ｒ２２的同源性为６８．１％；Ｒ３６与汉坦病毒序列同源性的成对比较结果也表明，Ｒ３６与血清Ⅰ型病毒的同源性均高于血清Ⅱ型病毒；Ｌｅａｋｅｙ虽然能被Ⅱ型引物扩增，但其序列与血清Ⅱ型病毒Ｒ２２的同源性仅为４４．９％，故不属于血清Ⅱ型病毒。上述研究结果表明，反转录聚合酶链反应能对多数汉坦病毒准确分型，但最终结果尚有赖于序列分析。
通过逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）从丙肝患者的血清中分离出编码完整ＨＣＶ核心蛋白（Ｃ区）的ｃＤＮＡ片段，并将其克隆到杆状病毒转移质粒中。重组转移质粒ＤＮＡ与线性的杆状病毒ＤＮＡ共转染Ｓｆ９昆虫细胞，经蚀斑筛选获得了带编码全部核心蛋白基因的重组杆状病毒。重组病毒感染细胞后表达ＨＣＶ核心蛋白，其分子量的为２０ｋＤ。免疫印染和酶联免疫实验表明，此重组蛋白能被人ＨＣＶ阳性血清所识别。动物实验表明此重组蛋白能诱导小鼠产生特异性抗体。
采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）从广东省一例慢性丙型肝炎病人血清中获得丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）５＇端非编码区（５＇ＮＣＲ）３０２ｂｐ的ｃＤＮＡ片段，经补齐和提纯后插入ｐＵＣ１９质粒，获得的重组体ｐＵＮ进行序列测定。将ｐＵＮ的目的基因亚克隆进体外转录载体ｐＳＰＯＲＴＩ多克隆位点的ＥｏｏＲＩ和ＰｓｔＩ切点之间，所得重组体ｐＳＮ线性化后由Ｔ＿７ＲＮＡ多聚酶及ＳＰ６ＲＮＡ多聚酶引导体外转录反应，产物经凝胶电泳及特异引物ＲＴ－ＰＣＲ，证实ＳＰ６引导的是正义ＲＮＡ，Ｔ７合成的是反义ＲＮＡ，其大小分别力４２９ｂｐ和３６２ｂｐ。并证实所得ＲＮＡ力ＨＣＶ５＇ＮＣＲｃＤＮＡ转录而来。获得的ＨＣＶ５＇ＮＣＲｃＤＮＡ和ＲＮＡ在常规逆转录和ＰＣＲ步骤中用于设立有效的模板对照，对消除假用性及评估试剂有重要意义。同时，ＨＣＶ５＇ＮＣＲ体外转录载体的构建可用于制各ＲＮＡ探针和反义ＲＮＡ，改进后还可作为定量ＰＣＲ的竞争性模板。
用生物活性法和双抗体夹心桥联酶免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）法检测了人类疱疹病素６型（ＨＨＶ－６）ＧＳ株和南京地方株ＣＮ５，８，１０感染的淋巴细胞培养上清中的肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的水平，发现培养２４ｈ即可检出高水平的ＴＮＦ，４８～７２ｈ述到峰值，此后逐渐下降，与未感染耐照组比较有及其显著的差异（Ｐ＜０．００１）。ＧＳ株与地方株同诱生ＴＮＦ水平无儿著性差异（Ｐ＞０．１），三株地方株诱生ＴＮＦ也无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。ＴＮＦ－α单抗可以完全中和培养上清中ＴＮＦ的活性，证实上清中有ＴＮＦ－α。与ＬＰＳ比较，ＨＨＶ－６诱生ＴＮＦ－α的能力要强得多。
利用超薄切片电子显微镜技术对本室分离的风疹病病毒（ＲＶ）ＪＲ＿（２３）株在ＢＨＫ＿（２１），细胞中的形态及形态发生过程进行了研究，同时与ＲＶ标准野毒株Ｇｏｓ－１０作了比较。结果表明，ＲＶＪＲ＿（２３）株感染ＢＨＫ＿（２１），细胞后６ｈ开始于细胞浆内观察到病毒颗粒，９６ｈ达到高峰。病毒颗粒呈图形，有双层脂质包膜包绕，直径４５～７５ｎｍ，核衣壳２５～３５ｎｍ。细胞浆内见到大量病毒相关颗粒，直径２０～３０ｎｍ。病毒包膜来自于细胞浆中的空泡膜或细胞膜。被ＲＶ感染的细胞浆中还观察到“繁殖复合体”，由膜性结构包绕着许多类似病毒颗粒的囊泡构成。丙株ＲＶ在形态与形态发生方面未发现差异。
空心莲子草经口服治疗流行性出血热病毒（ＥＨＦＶ）感染的乳鼠。结果显示，５、７．５、１０．０ｍｇ三个剂量组的存活率各为８０％、７２．２％和４０．０％，平均存活天数（ＭＴＤ）为５６．５±０．９、５３．５±１．１和４１．５±２．７ｄ，而病毒对照组的存活率为０．０％，ＭＴＤ为２６．３±０．８ｄ，经该药治疗的感染鼠体内的ＥＨＦＶ抗原表达减少，而未经治疗的感染乳鼠体内的ＥＨＦＶ抗原则在全病程中都显示出较强的表述。治疗组抗病毒效果类似于病毒唑，且口服病毒唑毒性小。说明空心莲子草在体内对ＥＨＦＶ感染鼠有治疗作用。
从病鸡肝分离到一株病毒，经电镜检查、理化特性分析、核酸电泳和中和试验等证明它为禽呼肠孤病毒（ＡＲＶ）。该病毒只在鸡胚肝细胞（ＣＥＬｉ）上产生细胞病变（ＣＰＥ），在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）和Ｖ＿（ｅｒｏ）细胞上不增殖，它对热无敏感，Ｍｇ￣（２＋）不能增强其对热的稳定性，其基因组中的４个小节段的迁移率与ＡＲＶＦＤＯ和Ｓ＿（１１３３）株明显不同，表明它是不同于ＦＤＯ和Ｓ＿（１１３３）的ＡＲＶ变异株。
以ＢＨＫ－２１细胞单层上增殖的伪狂犬病毒（Ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓｖｉｒｕｓ，ＰＲＶ），经离心浓缩后，用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ消化法分离纯化ＰＲＶ基因组ＤＮＡ。参照ＰＲＶＫａ株和ＮＩＡ－３株蛋白激酶（ＰＫ）基因的ＤＮＡ序列，设计并合成了一对长度为２６ｂｐ和３２ｂｐ的引物，以纯化的ＰＲＶ基因组ＤＮＡ为模板，用ＰＣＲ技术成功地扩增出我国伪狂犬病毒地方株的ＰＫ基因，并将它克隆于ｐＵＣ１９载体。酶切分析结果表明，所获ＰＫ基因克隆在ＰｓｔＩ、ＳｍａＩ、ＸｈｏＩ和ＳａｌＩ上的切点与ＰＲＶＮＩＡ－３株相同。为下一步进行ＰＫ基因的体外缺失和重组，以构建减毒的ＰＫ缺失疫苗株奠定了基础。
以江苏、河北某虾场病虾组织中提取的对虾的两种球状病毒作为抗原，制备出特异性强、效价较高的抗血清，用对流免疫电泳，酶联免疫吸附，免疫电镜技术对五个不同地区的病虾材料进行检测，结果表明：江苏、青岛、河北地区的病虾组织中均含有相应的球状病毒病原。
检测肾综合征出血热抗原特异性循环免疫复合物ＥＬＩＳＡ方法的建立张东海，孙辉，高峰（山东省淄博第二卫生学校，淄博２５５０１５）关键词肾综合征出血热病毒，循坏免疫复合物，特异性，ＥＬＩＳＡ肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）发病机理有多种学说，其中在体液免疫学说中...
卫星ＲＮＡ对黄瓜花叶病毒基因组ＲＮＡ体外合成的影响杨海花，康良仪，赵大健，田波（中国科学院微生物研究所，北京１０００８０）关键词卫星ＲＮＡ，黄瓜花叶病毒，依赖ＲＮＡ的ＲＮＡ聚合酶，体外合成利用卫星ＲＮＡ生防制剂控制田间的番茄、青椒、烟草等由黄瓜花叶病...
1983年田波等首次报道了应用病毒卫星RNA防治黄瓜花叶病毒(CMV)获得成功。将致弱病毒的卫星RNA加入协助病毒基因组中柯建一种新的致弱病毒。称谓卫星RNA生防制剂(BCA) 用BCA接种青椒、番茄等的幼苗，可保护其植株免受田间野生病毒的侵染[2-3]。最近我们的实验证明，BCA预先接种的和表达卫星RNA的转基因番茄植株接种马铃薯纺锤形块茎类病毒(PsTvd)时。显著降低了PSTVd的症状和组织内PSTVd的积累“]。为了探索有病毒卫星RNA的植物抵抗PSTVd的机理，我们比较了CMV Sat—RNA和PSTVd核背酸序列相关性。发现其问有47．8-66．7％同荔f性。井能形成长度为1O～12碱基的6个碱基配对区。为其抗病机理提供了一种可能的解释。
我国一种鹦鹉新病毒的分离冯烽，夏苇，赵林，陈绳亮（中国科学院武汉病毒研究所，武汉４３００７１）龚少宇（湖北省云梦县畜牧局，湖北云梦４３２５００）关键词鹦鹉病毒，病毒分离，长尾小鹦鹉国外有关鹦鹉病毒的研究不少，１９８１年Ｐｅｒｒｙ从澳大利亚鹦鹉体内分离...
39卷第2期 (2024年4月)
ISSN 1674-0769
EISSN 1995-820X
CN 42-1760/Q
主编: 石正丽
影响因子: 5.5*
*源于2022年JCR
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