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1998年13卷1期

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Review

丙型肝炎病毒翻译及调控机制

唐时幸

1998, 13(1): 1

丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)是单股正链RNA病毒,有单一阅读框架,编码约3010个氨基酸的病毒前体蛋白。HCV基因组结构和病毒蛋白的亲疏水性与黄病毒相似,因此将其归于黄病毒科丙型肝炎病毒群。

植物双生病毒研究进展

刘玉乐, 田波

1998, 13(1): 6

双生病毒(Geminivirus)是一组具有双生颗粒形态的单链环状DNA植物病毒[1~3]。典型的双生病毒为18×30nm颗粒,基因组大小为2.5~3.0knt。双生病毒研究已成为植物病毒学最活跃的领域之一.

人巨细胞病毒立即早期基因功能的研究进展

李磊, 徐进平, 叶林柏

1998, 13(1): 17

人巨细胞病毒(HCMV)是一种重要的病毒,属于疱疹病毒科,在普通人群中的感染率为 80%以上,对于某些特殊地区和人群,其感染率可高达100%。人群感染HCMV后,通常呈隐 性感染,但对于孕妇和免疫能力低下者(如器官移植病人、艾滋病患者),该病毒易导致严重的 病症,并且可能与肿瘤的诱发有密切关系? 。HCMV基因组为双链DNA,全长超过240 kbp, 至少包括208个开放阅读框架(()RF) 与疱疹病毒科的其它病毒一样,HCMV基因的表达呈 现出一定的时序性,即表达可分为立即早期(IE)、早期和晚期。其中,IE基因的表达被宿主因 子所激活[2一,不需要病毒蛋白质的合成,并在病毒其它基因以及宿主细胞的某些基因的表达 和调控方面有着重要的作用。主要IE因子(MIE)是IE基因中的主要组成部分,由该启动子 (MIEP)转录出的RNA经过不同方式的拼接,产生长度分别为1.95 kb、2.25 kb和1 70 kb的 三种mRNA,分别编码分子量为72kDa(IEl72)、86 kDa(IE286)、55 kDa(IE255)的三种蛋白.

肾综合征出血热病毒基因检测及分型的研究

雷万里, 唐家琪, 陆承平, 潘秀珍, 李先富

1998, 13(1): 28

根据流行于我国的两型HFRSV代表株汉滩型76118株及汉城型R22株M节段的核酸序列,设计两型共同引物,建立了逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)方法,检测39株从不同地区、不同宿主分离的HFRSV感染鼠脑及细胞培养物;同时还建立了捕捉ELISA法(cELISA),检测了39株中的36株,每份样本设复孔,以P/N≥2.10且P-N≥0.10者判为阳性。RTPCR及cELISA两法的检出率分别为97.6%与82.4%,二者符合率84.6%。此外,对RTPCR产物进行酶切分型,38份扩增产物中的15份可被AluI切开。根据所获酶切图谱的差异,可分为汉滩型及汉城型两型,显示了酶切分型的潜在价值

一株产生EB病毒的狨猴淋巴细胞株的建立

孙晓梅, 梁梧生, 代解杰, 高家鸿

1998, 13(1): 33

用B958细胞株产生的EB病毒,转化棉顶狨猴外周血淋巴细胞,获得KMT3细胞株。该细胞株能产生高滴度的EB病毒。含EB病毒衣壳抗原的自然阳性细胞率为3~5%,激活后达50~60%,其培养上清液可直接转化人淋巴细胞得到传代细胞系。KMT3细胞染色体数2n=46条

我国丙型肝炎病毒囊膜蛋白E_2高变区1的序列特征

方芳, 潘卫, 戚中田, 宋艳斌, 朱诗应

1998, 13(1): 39

对23例国内献血员、血透析及肝炎病人血清用反转录巢式PCR技术扩增了HCVRNA囊膜蛋白2基因的cDNA片段,并进行了序列测定。结果表明23例病人HCVE2/NS1N末端的核苷酸及氨基酸序列呈现多样性,高变区1(HVR1)位于核苷酸第1459~1559位,氨基酸第384~410位;我国HCV株HVR127个氨基酸中有15个位置氨基酸相对稳定,氨基酸组成与分布均与Sekiya报道的166个HCV株的不同。结果提示,研究我国HCV株HVR1的序列特征有助于HCV的流行病学研究,对研制适用于我国的抗体诊断试剂盒及进行疫苗研究均有重要的意义。

原位分子杂交法检测恙螨体内肾综合征出血热病毒核酸的研究

张云, 朱进, 李先富, 唐家琪, 吴光华, 张家驹, 周燕平

1998, 13(1): 44

为探讨肾综合征出血热病毒(HFRSV)在恙螨体内的分布和定位,采用原位分子杂交技术检测恙螨体内HFRSVRNA。结果发现:原位分子杂交技术的检出阳性率较IFAT高;HFRSV阳性信号颗粒呈弥散分布,多见于恙螨幼虫和若虫的腹部组织细胞内,该部位是恙螨的卵巢细胞、中肠及支囊上皮细胞。前体组织细胞内少见;个别幼虫和若虫的前足和中足细胞内亦可见到HFRSVRNA阳性信号。在原位分子杂交中,若虫组织细胞内的HFRSVRNA阳性信号较幼虫密集而且量多,表明HFRSV在恙螨体内可传递并有增殖现象

恩拉霉素抗乙型肝炎病毒的体外实验研究

吴婷, 黄海

1998, 13(1): 45

以HepG2.2.2.15细胞株为模型,以其分泌的HBsAg、HBeAg、HBVDNA及细胞存活率为观察指标,综合评价天然多肽类抗生素恩拉霉素体外抗HBV效果。结果表明恩拉霉素对HBsAg和HBeAg的50%抑制浓度IC50分别为27μg/mL和34μg/mL,治疗指数(TI)分别为5.9和4.6。Southern结果显示,50μg/mL恩拉霉素对细胞内游离HBVDNA抑制率为56.8%。

同型HCV不同分离株NS5区基因片段的比较分析

徐东刚, 逯好英, 牛建章, 朱分禄, 孟庆华, 孟宗达

1998, 13(1): 54

对同一地区两例输血后丙型肝炎进行PCR分型,结果为Ⅱ型。分别将其NS5区基因部分片段克隆到pUC18和M13mp18中,序列分析结果表明在NS5区基因相同区段,二者的核苷酸同源性为89.04%,氨基酸同源性为90.75%。而且在分离株V中第70~72位发现阅读框内终止密码子TGA。与Ⅱ型代表株HCVBK序列相比,相同区段的核苷酸和氨基酸同源性分别为:91.5%,91.92%和91.91%,91.91%。对比分析表明,在同一地区基因型相同的不同分离株间NS5区基因仍存在较大变异,分离株V可能为缺陷性病毒

重组轮状病毒SA11 Vp4抗原表位诱导广泛交叉中和抗体反应

陈元鼎, 刘名英, 赵玮, 戴长伯

1998, 13(1): 63

本文报导在RHVRNA2载体系统中表达的轮状病毒(RV)Vp4胰酶切割位点区抗原表位可诱导动物产生具有广泛交叉中和反应的血清抗体。携带有抗原表位REA、REB和REC,及其组合REA+REB+REC基因的pET重组质粒,高水平表达了这些与载体蛋白嵌合的抗原表位。进一步研究结果表明,这些抗原表位所诱导的动物血清抗体,具有广泛识别同源及异源血清型RV抗原的能力,和体外中和这些同源及异源血清型RV病毒感染性的能力。研究结果揭示RV胰酶切割位点区氨基酸序列具有重要的免疫学功能,它在FHVRNA2外源抗原表位载体系统中表达后,可作为新一代RV抗原表位亚单位疫苗的候选疫苗抗原。

新型戊型肝炎诊断试剂盒的研制及其应用

戎广亚 孙杰 周继文 任继明 张芳

1998, 13(1): 69

用HEVORF3合成肽及ORF2重组抗原研制成新型HEVEIA诊断试剂盒。与GenlabsHEVEIA检测比较,灵敏度和特异性均达100%(60/60)。三批试剂精密性测定均<10%。该试剂盒置4℃8个月或37℃4d保持稳定。检测不同肝炎患者HEV抗体,发现急性非甲非乙非丙肝炎中有63.2%,甲肝有13.4%,乙肝有8.3%,丙肝有6.6%,正常人群为2.9%。所研制的戊型肝炎诊断试剂盒,灵敏度高,特异性强,精密性好,稳定性合格。适用于戊型肝炎诊断及戊肝病毒感染的流行病学调查

用杆状病毒载体在家蚕细胞中表达HBeAg基因

邓小昭, 刁振宇, 何亮, 乔仁良, 张林元

1998, 13(1): 76

以PCR技术扩增含有PreC信号肽序列及完整的HBeAg基因的序列(即HBcAg基因5′端447bp),在5′端加上合适的酶切位点,克隆到家蚕核多角体病毒转移载体pBm030上,与野生型BmNPVDNA共转染家蚕BmN细胞,空斑纯化后得到多角体基因失活的重组病毒。ELISA法测定表明培养液上清中HBeAg效价达1∶32000,细胞内HBeAg效价为1∶2000,培养液及细胞内的HBcAg含量极低(<1∶160)。研究结果表明,BmN细胞能正确识别与切割HBeAg信号肽序列,所表达的HBeAg效价高,纯度好,明显优于大肠杆菌表达系统

中国棉铃虫核型多角体病毒DNA聚合酶基因的克隆和序列分析

王根, 张传溪, 季平, 金伟, 吴祥甫

1998, 13(1): 82

应用谷实夜蛾核型多角体病毒(HzSNPV)DNA聚合酶基因HindⅢ/PstⅠ3596bp片段作探针,经Sourthernblot杂交,克隆了中国棉铃虫核型多角体病毒(HaSNPV)完整的DNA聚合酶基因,大小约为3.4kb。限制性内切酶分析表明,HaSNPVDNA聚合酶基因限制性内切酶图谱与HzSNPV相似。用双脱氧链终止法测定该基因部分核苷酸序列(805bp),推导出编码区206a。序列同源性比较显示,HaSNPVDNA聚合酶与HzSNPV之间具有高度的同源性;与LdMNPV、AcMNPV、BmSNPV、CfMNPV和OpMNPV也具有一定的同源性.

中国棉铃虫核型多角体病毒不同基因型的虫体克隆

孙修炼, 张光裕, 张忠信, 胡志红

1998, 13(1): 83

首次利用虫体克隆技术,对野生型中国棉铃虫核型多角体病毒(HaSNPVW)的不同基因型进行了分离纯化。以较低浓度的HaSNPVW感染三龄初中国棉铃虫幼虫,病毒致死幼虫单虫收集,分别提取相应的病毒核酸,进行限制性内切酶分析,得到了HaSNPV的七个不同基因型(HaSNPVG1至G7),其EcoRI酶切图谱均不相同。用BamHI酶切分析,七个基因型的酶切图谱只在一个片段上有显著区别:G1、G2、G3、G4DNA的BamHIh片段大小是3.30kb,G5、G6的这一片段的大小为3.5kb,而G7的这一片段为2.7kb。结果表明,野生型HaSNPV至少包含七个不同的基因型。

我国真菌传线状小麦花叶病毒病病原初步鉴定为小麦黄花叶病毒(WYMV)

雷娟利, 陈炯, 陈剑平, 郑滔, 程晔

1998, 13(1): 96

由禾谷多粘菌(Polymyxagraminis)传播的线状小麦花叶病毒有两种,一种是加拿大首先报道的小麦梭条斑花叶病毒(WSSMV),另一种是日本报道的小麦黄花叶病毒(WYMV)。这两种病毒粒子形态以及血清学性质非常相似,但核酸序列存在一定差异。经反转录聚合酶链反应(RTPCR)和单链构象多态性分析(SSCP),明确我国广泛发生的禾谷多粘菌传线状小麦花叶病毒都是小麦黄花叶病毒,但供试的8个分离物RNA1和RNA2序列存在差异,无一彼此完全相同
Research Article

用逆转录套式PCR检测临床标本中的腮腺炎病毒RNA

武力, 宁小军, 李益民, 白植生

1998, 13(1): 100

流行性腮腺炎是儿童常见呼吸道传染病,并发症多为睾丸炎、无菌脑炎等。个别患者甚至因严重的脑炎并发症而死亡[1]。故有必要对患者进行早期病原诊断,以利于早期治疗。腮腺炎病毒RNA中小疏水蛋白(SH)基因作为高变区在不同毒株的分子特性鉴别中比其它基因片段更...